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- 产品名称:荧光法胞内总ROS检测试剂盒
- 产品货号:22901
- 产品品牌:AAT Bioquest
简单介绍
荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光
产品描述
Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光
货号 | 22901 | 存储条件 | f/l |
规格 | 200 Tests | 价格 | |
Ex (nm) | 520 | Em (nm) | 605 |
分子量 | 溶剂 | ||
产品详细介绍 |
活性氧(ROS)是氧正常代谢的天然副产物,在细胞信号传导中起重要作用。但是,在与氧化应激相关的状态下,ROS水平会急剧增加。 ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管**,糖尿病,骨质疏松症,中风,炎性**,许多神经退行性**和癌症中的作用已得到公认。 ROS测量将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Amplite 荧光ROS检测试剂盒使用我们独特的ROS指示剂来定量活细胞中的ROS。 Amplite ROS Red具有细胞渗透性。与ROS反应时会产生红色荧光。该试剂盒是一种优化的“混合和读取”测定形式。 Amplite 荧光ROS测定试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法,可在1-2小时的孵育中检测活细胞中的细胞内ROS。该测定可以以方便的96孔或384孔板形式进行,无需分离步骤即可轻松实现自动化。使用荧光酶标仪或荧光显微镜可以轻松读取其信号。它可用于定量ROS活性或筛选ROS抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供上等的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。
产品说明书
样品实验方案
简要概述
- 在生长培养基中准备细胞
- 加入Amplite ROS Red工作溶液(对于96孔板为100 µL /孔,对于384孔板为25 µL /孔)
- 在37°C下孵育细胞1小时
- 用测试化合物处理细胞以诱导ROS
- 在Ex / Em = 520/605 nm(截止= 590 nm)或安装Ex / Em = 520/605 nm滤光片的荧光显微镜下检测荧光增加(底部读取模式)
溶液配制
储备溶液配制
1. Amplite ROS Red储备液(500X):将40 µL DMSO(组分C)添加到Amplite ROS Red(组分A)的小瓶中,并充分混合以制成500X Amplite ROS Red储备液。 避光。 注意:20 µL 500X Amplite ROS Red储备液足以用于1个板。 注意:如果将试管紧密密封并避免光照,可以将未使用的部分等分并在<-20°C下保存超过一个月。 避免重复冻融循环。
工作溶液配制
将20 µL 500X Amplite ROS Red储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液(组分B)中,并充分混合以制成Amplite ROS Red工作溶液。 注意:此Amplite ROS Red工作溶液在室温下至少可稳定2小时。
实验步骤
1.将100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的Amplite ROS Red工作溶液添加到细胞板中。
2.将细胞在5%CO2、37°C的培养箱中孵育一小时。
3.在所需的缓冲液(例如PBS或HHBS)中,用20µL 11X测试化合物(96孔板)或10 µL 6X测试化合物(384孔板)处理细胞。 对于对照孔(未处理的细胞),添加相应量的化合物缓冲液。
4.要诱导ROS,请在室温下或在5%CO2、37°C的培养箱中孵育细胞板至少15分钟(对于用1 mM H2O2处理的Hela细胞为30分钟)。
5.在Ex / Em = 520/605 nm(截止= 590 nm)处使用荧光酶标仪(底部读取模式)检测荧光的增加,或在Ex / Em = 520/605 nm滤光片组(Texas Red)下使用荧光显微镜观察细胞)。