Cell Navigator F-肌动蛋白（F-Actin）标记试剂盒是一套荧光成像工具，用于标记亚细胞细胞器，如膜，溶酶体，线粒体，细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法。

        该特定试剂盒设计用于标记蓝色荧光中固定细胞的F-肌动蛋白。该试剂盒使用蓝色荧光鬼笔环肽缀合物，其选择性结合F-肌动蛋白。 鬼笔环肽缀合物具有Ex / Em = 350 / 450nm，与大多数荧光显微镜附带的DAPI滤光片组相容。 它是一种高亲和力探针，用于标记，鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片，细胞培养或无细胞实验中的F-肌动蛋白。Cell Navigator F-肌动蛋白（F-Actin）标记试剂盒是由美国AAT Bioquest 研发的。

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产品说明书

分析方案

概述

准备样品（微孔板孔）

从板上取下液体加入100μL/孔的iFluor 350-Phalloidin溶液

在室温下染色细胞15到60分钟

洗涤细胞

在Ex / Em = 350 / 450nm下在显微镜下观察样品

操作方法

1.准备1X iFluor 350-鬼笔环肽工作溶液：

将10μL的iFluor 350-鬼笔环肽（组分A）加入10mL标记缓冲液（组分B）中。

注1：未使用的iFluor 350-鬼笔环肽原液（组分A）应等分并保存在-20℃，避光。

注2：不同的细胞类型可能染色不同。应相应地制备iFluor 350-鬼笔环肽工作溶液的浓度。

2.染色细胞：

2.1执行甲醛固定。在室温下用3.0-4.0％甲醛的PBS孵育细胞10-30分钟。

注意：避免使用任何含甲醇的固定剂，因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。

2.2用PBS冲洗固定的细胞2-3次。

2.3可选：在PBS中加入0.1％Triton X-100固定细胞（步骤2.2）3至5分钟，以增加渗透性。用PBS冲洗细胞2-3次。

2.4将100μL/孔（96孔板）的1X iFluor™350-鬼笔环肽工作溶液（来自步骤1）加入固定的细胞（来自步骤2.2或2.3），并在室温下染色细胞15至60分钟。

2.5用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以去除多余的染料，然后使用DAPI通道进行板密封和成像。

图1.用甲醛固定并用Cell Navigator F-肌动蛋白标记试剂盒染色的CPA细胞的图像*在Costar黑色96孔板中的蓝色荧光* A：用1X iFluor 350-鬼笔环肽标记细胞仅30分钟。 B：用鬼笔环肽处理细胞10分钟，然后用1X iFluor 350-鬼笔环肽染色30分钟。