上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品名称:AAT Bioquest 5-羧基荧光素叠氮化物
- 产品货号:131
- 产品品牌:AAT Bioquest
简单介绍
美国AAT Bioquest Inc是生物光谱领域的全球***,AAT 产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学,**学,细胞生物学和分子生物学,更高效的帅选新药。作为AAT Bioquest在中国的**战略合作伙伴,金畔生物将与AAT优势互补,为国内外客户提供光谱学检测、底物显色、荧光和发光技术等全系列解决方案。
产品描述
5-FAM 5-羧基荧光素叠氮化物
5-羧基荧光素叠氮化物是美国AAT Bioquest生产的荧光素,5-FAM叠氮化物是通过与炔基反应开发荧光生物 共轭物的良好试剂。 5-FAM是羧基荧光素的纯化单一异构体。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供* 上等的5-羧基荧光素叠氮化物。 点击查看光谱
产品说明书 操作方案 标记寡核苷酸 1.准备以下试剂: 200mMTHPTA [tris(3-羟丙基三唑基甲基)胺]水溶液 100mM CuSO4水溶液 炔烃修饰的低聚水溶液(尽可能浓缩,例如> 10 mg / mL) 100 mM抗坏血酸钠水溶液 10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站) 2.在反应前将CuSO4与THPTA以1:2的比例混合并充分涡旋几分钟。该溶液在冷冻时可稳定数周。 3.向炔烃改性的低聚物溶液中加入过量的染料叠氮化物(摩尔比为2-5当量)。 4.加入5当量的THPTA / CuSO4工作溶液(来自步骤1)。 5.加入10-30当量的抗坏血酸钠。 6.在室温下搅拌,涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。 7.乙醇通过所需方法(例如HPLC)沉淀或纯化寡聚物。
标记肽 1.准备以下试剂: 200 mM THPTA配体水溶液 100mM CuSO4水溶液 炔烃修饰肽水溶液或DMF溶液(取决于您的肽溶解度,如果可能,> 10 mg / mL) 100 mM抗坏血酸钠水溶液 10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站) 2.在反应前几分钟以1:2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。 3.向炔烃修饰的肽溶液中加入过量的染料叠氮化物(摩尔比为5-10当量)。 4.加入5-10当量的THPTA / CuSO4。 5.加入10-20当量的抗坏血酸钠。 6.在室温下搅拌,涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。 7.通过HPLC纯化您想要的肽。
标记炔烃有机小分子 1.准备以下试剂: 200 mM THPTA配体水溶液 100mM CuSO4水溶液 炔烃化合物水溶液或DMF溶液(取决于您的化合物溶解度,如果可能,> 10mg / mL,) 100 mM抗坏血酸钠水溶液 10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站)。 2.在反应前几分钟以1:2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。当冷冻时,该溶液可稳定数周。 3.向炔烃溶液中加入过量的染料叠氮化物(摩尔比为5-10当量)。 4.加入25当量的THPTA / CuSO4。 5.加入50当量的抗坏血酸钠。 6.在室温下搅拌反应混合物30-60分钟。 7.通过色谱或其他方法纯化您想要的分子。
标记生物聚合物 1.准备以下试剂: 200 mM THPTA配体水溶液 100mM CuSO4水溶液 炔烃改性的水中生物聚合物(尽可能浓缩,例如> 5毫克/毫升) 100 mM抗坏血酸钠水溶液 10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站)。 2.在反应前几分钟以1:2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。 3.向炔烃改性的生物聚合物溶液中加入过量的染料叠氮化物(负载比:5-20染料叠氮化物/炔烃)。 4.加入5摩尔当量(参考染料叠氮化物)的THPTA / CuSO4。 5.加入10当量的抗坏血酸钠(参见染料叠氮化物)。 6.在室温下搅拌,涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。 7.通过凝胶过滤或透析纯化您想要的分子。
标记细胞,细胞裂解物或生物样品 1.准备以下试剂: 水性缓冲液或100mM THPTA配体水溶液 20mM CuSO4水溶液 300mM抗坏血酸钠水溶液 2.5mM炔烃或叠氮化物标记试剂水溶液或DMSO溶液 2.对于每个叠氮化物或炔烃修饰的细胞或细胞裂解物样品,将以下试剂加入1.5 mL微量离心管中,然后短暂涡旋混合。 50μL细胞或细胞裂解液样品 50μLPBS缓冲液 50μL5mM相应的染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(或染料炔烃)检测试剂 3.加入10μL100mM THPTA溶液,短暂涡旋混合。 4.加入10μL20mM CuSO4溶液,短暂涡旋振荡。 5.加入10μL300mM抗坏血酸钠溶液以引发点击反应,短暂涡旋混合。 6.保护点击反应不受光照,使其在室温下孵育30分钟。 7.点击标记细胞或细胞裂解物并准备用于下游处理和/或分析。
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