Live or Dead 细胞活性检测试剂盒 *红/蓝双色荧光

Live or Dead 细胞活性检测试剂盒 *红/蓝双色荧光*

        Live or Dead 细胞活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞活性检测试剂盒，AAT Bioquest的Mycolight **活力测定试剂盒可在革兰氏阳性和阴性**中提供**活力的双色荧光测定。该试剂盒利用我们的绿色荧光核酸染色剂MycoLight Green和红色荧光核酸染色碘化丙啶的混合物。单独使用时，MycoLight 绿色污渍通常会标记群体中的所有**（活的和死的）。相比之下，碘化丙锭只穿透膜受损的**，当两种染料都存在时，导致MycoLight 绿色染料荧光的减少。因此，使用MycoLight 绿色和碘化丙啶的适当混合物，具有完整细胞膜的活**发出绿色荧光，而具有损伤膜的死亡或濒死的** 产生红色荧光。Mycolight **活力测定试剂盒是监测**种群活力的强大工具，可作为细胞膜完整性的函数。可以在510-530nm（FITC滤光片）和600-660nm（德克萨斯红色滤光片光片）处以488nm处（*常见的激发光源）激发荧光测定染色的细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供上等的Live or Dead 细胞活性检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞
2.添加染料加工溶液
3.在室温或37°C孵育30分钟至1小时
4.在Ex / Em = 610/650 nm（截止= 630 nm，红色）和Ex / Em = 360/450 nm（截止= 420 nm，蓝色）或在荧光显微镜下观察（Texas red/Cy5通道   活细胞），（DAPI通道  死细胞）

工作溶液配制

将5μL的200X Cellbrite Red（组分A）和5μL的200X Nuclear Blue DCS1（组分C）加入1mL的测定缓冲液（组分B）中并充分混合以制备染料 – 工作溶液。 该染料加工溶液在室温下稳定至少1小时。 注意：由于*佳染色条件可能因细胞类型的不同而异，因此建议单独确定组分A和C的适当浓度。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.根据标准方案准备细胞。 注意：我们用星形孢菌素（SS）在37℃下处理HeLa细胞4小时以诱导细胞凋亡。 详细信息请参见图1。

2.用100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的染料加工溶液替换生长培养基。

3.将染料加工溶液板在室温或37°C孵育30分钟至1小时，避光。

4.用HHBS，PBS或您选择的缓冲液洗涤细胞两次。

5.向细胞中加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的测定缓冲液（组分B）。

6.用荧光显微镜监测荧光信号，用德克萨斯红或Cy5过滤器检测活细胞，用DAPI过滤死细胞。 还可以使用荧光酶标仪（底部读取模式）在Ex / Em = 610 / 650nm（截止= 630nm，红色）和Ex / Em = 360 / 450nm（截止= 420nm，蓝色）下分析荧光强度。

数据分析