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- 产品名称:MUP, disodium salt
- 产品货号:11612
- 产品品牌:AAT Bioquest
简单介绍
MUP, disodium salt,广泛地用于溶液中磷酸酶的检测。然而这种磷酸酶底物并不适用于活细胞或者连续性分析,因为MUP, disodium salt,酶促反应产物,只有在PH>10时才发出*大荧光。因此用MUP检测酸性范围内磷酸酶仍然是个难题,例如检测酸性磷酸酶
产品描述
简要概述
4-甲基伞形酮磷酸二钠盐三水 MUP二钠盐是美国AAT Bioquest生产的MUP,MUP二钠盐是磷酸酶的荧光底物,它广泛地用于溶液中磷酸酶的检测。然而这种磷酸酶底物并不适用于活细胞或者连续性分析,因为MU(4-甲基伞形酮),酶促反应产物,只有在PH>10时才发出*大荧光。因此用MUP检测酸性范围内磷酸酶仍然是个难题,例如检测酸性磷酸酶。AAT Bioquest很高兴为大家提供MUP Plus,它与MUP底物相联系克服了其pH的限制性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供*上等的4-甲基伞形酮磷酸二钠盐三水 MUP二钠盐。
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产品说明书
实验方案
1.准备工作:
1.1在升值溶剂中制备2至10 mM的储备溶液(参见表)。 应立即使用原液。 任何未使用的溶液需要等分并在<-20℃冷冻。
注1:不要使用DMSO,ETOH或METH制备SunRed™磷酸盐(目录号11629)的储备溶液,因为它会显着增加分析背景。
注2:避免反复冻融循环,避免光照。
1.2制备2X磷酸盐工作溶液:在实验当天,将底物溶解在升值溶剂中或在室温下解冻等份的储备溶液(来自步骤1.1)。 在100 mM Tris缓冲液或您选择的缓冲液(pH 8至9)(非磷酸盐缓冲液)中制备10至50μM的2X工作溶液。
2.在上清液中进行磷酸酶测定:
2.1将50μL2X磷酸盐工作溶液(来自步骤1.2)加入磷酸酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中,使总磷酸酶测定体积为100μL/孔。
注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μL2X磷酸盐工作溶液。
2.2在所需温度下孵育反应30至120分钟,避光。
2.3用荧光板读数器监测适当滤光片组(见表)的荧光增加。
2.4空白孔中的荧光(仅含测定缓冲液)用作对照,并从具有磷酸酶反应的那些孔的值中减去。