Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。

Cell Meter 细胞自噬检测试剂盒 蓝色荧光

        Cell Meter 细胞自噬检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞自噬的试剂盒，自噬是一种进化上保守的降解过程，其靶向长寿命蛋白质，细胞器和其他细胞质成分，通过溶酶体途径降解。自噬途径与遍在蛋白 – 蛋白酶体途径的作用互补，其通常降解短寿命蛋白质。多重细胞作用需要激活自噬途径，包括饥饿期间的存活，细胞内组分的**，发育和**。在没有压力的情况下，自噬具有管家功能，去除受损的细胞器和细胞成分，防止细胞毒性作用。自噬的减少和缺陷与多种**有关，例如Huntingtons，Alzheimers和Parkinsons。就癌症发展而言，自噬似乎扮演着多重角色。某些自噬蛋白（如Beclin-1和Bif-1）的表达减少或缺失会增加小鼠的肿瘤易感性，而这些蛋白的过表达可抑制癌细胞的生长。然而，自噬对于实体瘤的营养**和缺氧核心内的癌细胞的存活是至关重要的。 Cell Meter 自噬试剂盒使用Autophagy Blue 作为特异性自噬体标记来分析自噬的活性。该测定被优化用于直接检测分离和附着细胞中的自噬。该试剂盒为分析方案提供了所有必需的组分。 Cell Meter 自噬试剂盒适用于荧光显微镜，荧光酶标仪和流式细胞仪。 Autophagy Blue 在Ex / Em = 333 / 518nm处具有荧光激发和发射。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供上等的Cell Meter 细胞自噬检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞，密度为1 – 2×10⁴个细胞/孔
2.添加Autophagy Blue 工作溶液
3.在37°C孵育15-60分钟
4.用洗涤缓冲液洗涤细胞
5.监测Ex / Em = 330 / 520nm处的荧光增加（截止= 475nm），使用DAPI滤光片组的荧光显微镜或使用Ex / Em = 330 / 520nm通道的流式细胞仪

工作溶液配制

将20μL500XAutophagy Blue （组分A）加入10 mL染色缓冲液（组分B）中并充分混合以制备Autophagy Blue 工作溶液。 避光。 注意：对于一个96孔板，20μL的500X Autophagy Blue （组分A）就足够了。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.根据您的特异性诱导方案（约1-2×104个细胞/孔/ 96孔板）将细胞培养至*适于自噬诱导的密度。同时，对于每种标记条件，以与诱导群体相同的密度培养非诱导的阴性对照细胞群。

2.去除培养基

3.向每个孔中加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Autophagy Blue 工作溶液。

4.将细胞在37°C，5％CO₂培养箱中孵育15至60分钟。注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

5.用洗涤缓冲液（组分C）洗涤细胞3-4次，然后向每个孔中加入100μL洗涤缓冲液（组分C）。注意：如果细胞看起来没有充分染色，建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 330 / 520nm（截止= 475nm），具有DAPI滤光器组的荧光显微镜或具有Ex / Em = 330 / 520nm通道的流式细胞仪监测荧光强度。

数据分析