Cell Meter **活性检测试剂盒 货号:22400-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称:Cell Meter **活性检测试剂盒
  • 产品货号:22400
  • 产品品牌:AAT Bioquest

简单介绍

Cell Meter **活性检测试剂盒

产品描述

Cell Meter **活性检测试剂盒

Cell Meter **活性检测试剂盒  货号:22400

货号 22400 存储条件                     f/l
规格                             200 Tests                         价格                 
Ex (nm) 481 Em (nm) 510
分子量 溶剂
产品详细介绍

        Cell Meter **活力检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测**活力的试剂盒,AAT Bioquest的Mycolight **活力检测试剂盒提供革兰氏阳性和阴性**细胞中**活力的双色荧光检测。该试剂盒使用我们的绿色荧光核酸染色MycoLight Green和红色荧光核酸染色碘化丙啶的混合物。单独使用时,MycoLight Green染色剂通常标记人群中的所有**(活的和死的)。相比之下,碘化丙锭仅渗透膜受损的**,当存在两种染料时,导致MycoLight Green染色荧光减少。因此,使用MycoLight Green和碘化丙锭染料的适当混合物,具有完整细胞膜的活**发出绿色荧光,而具有受损膜的死亡或垂死**产生红色荧光。 Mycolight **活力检测试剂盒是一种强大的工具,用于监测**群体的活力,作为细胞膜完整性的函数。可以在510-530nm(FITC滤光器)和600-660nm(德克萨斯红色滤光器)下荧光测量染色细胞,激发波长为*常见的激发光源488nm。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供上等的Cell Meter **活力检测试剂盒。 

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产品说明书

操作方法

溶液配制

染料工作溶液(250X):
在微量离心管中加入等体积的MycoLight Green(组分A)和碘化丙啶(组分B)并充分混合。 注意:每次准备新鲜的工作溶液。

样品实验方案

1.在任何适当的培养基中培养**从对数期培养物中获得健康**的*佳结果。在0.85%NaCl或适当的缓冲液中将**培养物稀释至~106至108个细胞/ mL。准备足够的悬浮液,为流式细胞仪每次测试提供500μL,或为96孔板提供每次测试100μL。注意:在染色**之前去除生长培养基的痕迹。单次洗涤步骤通常足以从**悬浮液中除去显着痕量的干扰介质组分。建议不要使用磷酸盐清洗缓冲液,因为它们会降低染色效率。

2.向每mL**悬浮液中加入4μL染料工作溶液(250X)。充分混合并在室温下孵育15分钟。避光。

3.可以通过荧光显微镜,荧光酶标仪或流式细胞术分析染色的**细胞。

4.来自活**和死**的荧光可以与任何标准荧光素长通滤光片组同时观察。或者,可以用荧光素和德克萨斯红过滤器组分别观察活的(绿色荧光的)和死的(红色荧光的)细胞。

数据分析

Cell Meter **活性检测试剂盒  货号:22400

图1.用Cell Meter **活力测定试剂盒(Cat#22400)染色的大肠杆菌HST08的荧光图像。 具有完整细胞膜的活**显示绿色荧光(左),而具有受损膜的70%酒精杀死的死**(右)显示红色荧光。 活的和死的大肠杆菌**细胞也在混合群体中可视化(中)。

Cell Meter活细胞Caspase 3/7结合检测试剂盒红色荧光 货号:20101-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称:Cell Meter活细胞Caspase 3/7结合检测试剂盒红色荧光
  • 产品货号:20101
  • 产品品牌:AAT Bioquest

简单介绍

我们的Cell Meter 活细胞半胱天冬酶活性检测试剂盒基于半胱天冬酶的荧光抑制剂。这些抑制剂具有细胞渗透性和非细胞毒性。一旦进入细胞,半胱天冬酶抑制剂与活性半胱天冬酶共价结合

产品描述

Cell Meter 活细胞Caspase 3/7结合检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter活细胞Caspase 3/7结合检测试剂盒红色荧光  货号:20101

货号                              20101                               存储条件                         f/l                               
规格 25 Tests 价格
Ex (nm) 545 Em (nm) 570
分子量 溶剂
产品详细介绍

        我们的Cell Meter 活细胞半胱天冬酶活性检测试剂盒基于半胱天冬酶的荧光抑制剂。这些抑制剂具有细胞渗透性和非细胞毒性。一旦进入细胞,半胱天冬酶抑制剂与活性半胱天冬酶共价结合。胱天蛋白酶3/7的激活对于细胞凋亡的起始是重要的。已经证明胱天蛋白酶3/7对肽序列Asp-Glu-Val-Asp(DEVD)具有底物选择性。该试剂盒使用TF3-DEVD-FMK作为半胱天冬酶3/7活性的荧光指示剂。TF3-DEVD-FMK在凋亡细胞中不可逆地结合活化的胱天蛋白酶3/7。一旦与胱天蛋白酶3/7结合,荧光试剂保留在细胞内。结合抑制caspase 3/7,但不会阻止细胞凋亡的进行。

        有多种参数可用于监测细胞凋亡。这种Cell Meter 活细胞半胱天冬酶3/7活性测定试剂盒旨在通过测量活细胞中胱天蛋白酶3/7的活化来检测细胞凋亡。它用于定量凋亡细胞中活化的caspase 3/7活性,或用于筛选caspase 3/7抑制剂。TF3-DEVD-FMK,红色标记试剂,允许通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪直接检测凋亡细胞中活化的半胱天冬酶3/7。该试剂盒为所有必需组分提供优化的分析方案。

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产品说明书

分离细胞的检测方案

概述

用测试化合物制备细胞,密度为5×105至2×106个细胞/ mL

将TF3-DEVD-FMK以1:150的比例加入细胞溶液中

在室温下孵育1小时

沉淀细胞,用缓冲液或生长培养基洗涤并重悬细胞

在Ex / Em = 550 / 595nm处分析细胞

注:使用前将所有部件在室温下解冻。

操作方法

1.根据您的特异性诱导方案,将细胞培养至*适于细胞凋亡诱导的密度,但不超过2 x 106个细胞/ mL。同时,对于每种标记条件,以与诱导群体相同的密度培养非诱导的阴性对照细胞群。以下是一些诱导悬浮培养细胞凋亡的例子:

1)用2μg/ ml喜树碱处理Jurkat细胞3小时。

2)用1μM星形孢菌素处理Jurkat细胞3小时。

3)用4μg/ ml喜树碱处理HL-60细胞4小时。

4)用1μM星形孢菌素处理HL-60细胞4小时。

注意:应对每个细胞系进行单独评估,以确定诱导细胞凋亡的*佳细胞密度。

2.通过向TF3-DEVD-FMK(组分A)的小瓶中加入50μLDMSO制备150X TF3-DEVD-FMK DMSO储备溶液。 将150×TF3-DEVD-FMK以1:150的比例加入细胞溶液中,并将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育1小时。

注1:对于TF3-DEVD-FMK标记,细胞可以浓缩至~5×10 6个细胞/ mL。 未使用的150X TF3-DEVD-FMK DMSO储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20°C。

注2:对于粘附细胞,用0.5mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用TF3-DEVD-FMK孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

注3:适当的孵育时间取决于所用的细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。

3.将细胞以约200g旋转5分钟,并用1mL洗涤缓冲液(组分B)洗涤细胞两次。 将细胞重悬于所需量的洗涤缓冲液中。

注1:TF3-DEVD-FMK是荧光的,因此**任何未结合的试剂以消除背景非常重要。

注2:对于分离的细胞,应将细胞浓度调节至每个微量滴定板孔中2-5×10 5个细胞/100μL等分试样,用于步骤5。

4.如果需要,用DNA染色标记细胞(例如用于死细胞的Nuclear Green DCS1,或用于细胞核染色的整个群体的Hoechst)。

5.通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪在Ex / Em = 550/595 nm处检测荧光强度(对于Nuclear Green DCS1,Ex / Em = 490/525 nm,对于Hoechst染料,Ex / Em = 350/461 nm)

5.1对于流式细胞仪,使用Ex / Em = 550/595 nm(用于Nuclear Green DCS1染色的FL1通道)的通道监测荧光强度。

5.2用于荧光显微镜和荧光酶标仪。 将100μL细胞悬浮液置于96孔黑色微量滴定板的每个孔中。

注意:如果需要平衡细胞浓度,调整诱导细胞的悬浮体积以接近非诱导细胞群的细胞密度。 如果您的细胞**不会导致受刺激细胞群数量的显着损失,则此调整步骤是可选的。

5.3使用TRITC通道(用于Nuclear Green DCS1染色的FITC通道,用于Hoechst染色的DAPI通道)在荧光显微镜下观察细胞。

5.4使用荧光酶标仪,使用Ex / Em = 550/595 nm(在570 nm处截止)底部读取模式监测荧光强度。

Cell Meter 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒 货号:36385-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称:Cell Meter 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒
  • 产品货号:36385
  • 产品品牌:AAT Bioquest

简单介绍

Cell Meter 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒

产品描述

Cell Meter 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒

Cell Meter 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒  货号:36385

货号 36385                        存储条件                  f/l                 
规格                        100 Tests
Ex (nm) 490 Em (nm) 515
分子量 溶剂
产品详细介绍

        Cell Meter 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的脂肪酸检测试剂盒,脂肪酸摄取是**许多人类**(例如肥胖症,2型糖尿病和肝脏脂肪变性)的重要**靶标。 Screen Quest 荧光脂肪酸摄取分析试剂盒为测量含有脂肪酸转运蛋白的细胞中的脂肪酸提供了一种简单而灵敏的方法。 该试剂盒使用专有的十二烷酸荧光脂肪酸底物。 该脂肪酸摄取测定试剂盒可在具有底读模式或FITC通道的任何荧光酶标仪上进行。 该测定可以在96孔或384孔微量滴定板中以简单的混合和读取程序进行,并且易于适应高通量筛选应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供上等的Cell Meter 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中培养细胞4-6小时
2.将细胞转移到无血清培养基中1小时,并根据需要处理细胞
3.加入100μL/孔的脂肪酸染料加载溶液
4.监测荧光增加在Ex / Em = 485/515 nm处立即进行动力学或在孵育60分钟后进行终点读数(底部读取模式)

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
TF2-C12脂肪酸原液:
将20μLDMSO(组分C)加入到TF2-C12脂肪酸(组分A)的小瓶中并充分混合。 注意:20μL荧光脂肪酸底物原液足以用于一个平板。 如果将管密封并避光,可以将未使用的荧光脂肪酸底物储备溶液等分并在<-20℃下储存长达两个月。 避免反复冻融循环

2.工作溶液配制

脂肪酸染料加载溶液:
将20μLTF2-C12脂肪酸储备溶液加入10mL分析缓冲液(组分B)中并充分混合。 注意:10毫升脂肪酸染料加载溶液足以用于一个平板; 为每个平板做准备并进行实验。

操作步骤

1.根据需要用测试化合物处理细胞。

2.从培养箱中取出化合物处理的细胞板,加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)(包括空白孔)的脂肪酸染料加载溶液。

3.使用底部读取模式,使用荧光酶标仪在Ex / Em = 485 / 515nm(在495nm处截止)测量荧光信号。 注意:对于动力学读数:立即以20秒间隔读取荧光强度30-60分钟。 注意:对于终点读数:读取30-60分钟孵育结束时的荧光强度。

数据分析

Cell Meter 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒  货号:36385

图1. 3T3-L1脂肪细胞和成纤维细胞对脂肪酸摄取的比较。 将细胞以50,000个细胞/ 100mL /孔接种在96孔黑色壁/透明底部聚-D赖氨酸平板中5小时,然后将血清剥夺1小时。 在没有(对照)或用胰岛素(150nM)处理细胞,并在37℃,5%CO 2培养箱中孵育30分钟。 在孵育时间结束时,将100μl脂肪酸混合物加入孔中,并再孵育60分钟,使用底部读取模式用FlexStation读板仪测量荧光信号。 A  – 成纤维细胞(对照); B  – 成纤维细胞(胰岛素); C  – 脂肪细胞(对照); D-脂肪细胞(胰岛素)。