荧光量子产率测定试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料，当荧光团吸收光子时，形成能量激发态。该物种的命运是多种多样的，取决于荧光团及其周围环境的确切性质，但*终结果是失活（能量损失）并返回基态。发生的主要失活过程是荧光（通过发射光子引起的能量损失），内部转换和振动弛豫（作为向周围环境的热量的非辐射能量损失），以及系统间交叉到三重态流形和随后的非辐射失活。荧光量子产率是吸收的光子与通过荧光发射的光子的比率。换句话说，量子产率给出了激发态通过荧光而不是通过另一种非辐射机制而失活的概率。该试剂盒为生物结合物的荧光量子产率测定提供了所有必需成分。它被优化用于确定荧光蛋白缀合物，肽，核苷酸和核酸的荧光量子产率。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供*上等的荧光量子产率测定试剂盒 。 

适用仪器

表1.试剂盒组分在水中的量子产率和类似波长的染料的相应量子产率，供参考标准选择。

产品说明书

样品实验方案

1.使用由其储备溶液制备的稀释溶液和水性缓冲液（例如PBS或TRIS）记录所选标准品和测试样品（0.1至5μM）的吸光度光谱。

2.根据吸收*大值选择激发波长。我们建议使用以下公式来选择所需的激发波长：
     所需的激发（nm）=较短的吸收*大值* – 50nm
*选自参考标准品或测试样品。例如，如果您的测试样品在500 nm处具有*大吸收，并且所选参考标准在490 nm处具有*大吸收，则应选择440 nm（490 nm – 50 nm）作为激发波长。 

3.调整所选参考标准品和测试样品的浓度，使其在选定的激发波长下具有相同的吸光度（在0.2至0.8之间）。注意：选择参考标准的等吸光点和测试样品吸收光谱可能更容易。

4.使用相同的缓冲液或纯水稀释所选参考标准品和测试样品10次（必须用相同比例稀释）。

5.使用可以产生校正荧光光谱的荧光分光光度计或酶标仪在10mm荧光比色皿中记录相同稀释溶液的荧光光谱。注意：必须使用相同的仪器设置记录所有荧光光谱。更改样品之间的仪器设置将使量子产率测量无效。
 
 
数据分析

1.从完全校正的荧光光谱计算积分荧光强度（荧光光谱的面积）（参见仪器说明书）。

2.使用以下等式计算荧光量子产率：Φ _{– [R} =Φ _小号 * A _{– [R} / A _小号
Φ _ř和Φ _小号分别被选择的参考标准和测试样品的荧光量子产率。a _r和A _s分别是所选参考标准品和测试样品的积分荧光强度（曲线面积）。

图1.荧光原理。电子被外部源激发到更高的能量水平。在返回其基态时，设定的光子量子与电子的能量损失成比例地释放。这种光子的释放代表荧光发射。荧光团的量子产率是它发射的光子与它吸收的光子的比率。