Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒 绿色荧光

Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒 绿色荧光

简要概述

        Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于标记活细胞的试剂盒，对活细胞中的RNA分子进行检测和成像对于多种分子生物学程序极为重要，包括物理运输，遗传信息解释，基因表达调控和某些重要的生物催化作用。 在活细胞中染色RNA的主要挑战是DNA造成的干扰。 为了解决该困难，开发了新型绿色荧光染料作为RNA选择性探针。 AAT Bioquest的Cell Navigator 活细胞RNA成像套件包括StrandBrite RNA Green，因为它能特异性结合细胞中的RNA。 与用于体内RNA染色的商用SYTO®RNA Select染料相比，StrandBrite RNA Green显示出更亮的信号和对RNA的更好的选择性。 此外，该试剂盒可对活细胞和固定细胞中的RNA进行染色。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供上等的Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备细胞
2.添加StrandBrite RNA Green工作溶液
3.孵育30-60分钟
4.在Ex / Em = 490/520 nm（FITC滤光片组）的荧光显微镜下分析细胞

样品示例及操作

1.根据特定的诱导方案将细胞培养至*适合成像的密度（约1-2×10⁴个细胞/孔/ 96孔板）。
2.对于活细胞：将室温下用培养基或活细胞染色缓冲液（组分B）中稀释400倍的StrandBrite RNA Green（组分A）孵育细胞30-60分钟（100 µL /孔）。注意：25 µL StrandBrite RNA Green（组分A）足以容纳一个96孔板。避光并避免重复的冻融循环。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。有关详细信息，请参见图1。
3.对于固定细胞：在室温下用纯甲醇固定细胞1分钟，然后用PBS洗涤。将细胞浸入1％Triton-100中2分钟，然后用PBS洗涤两次。在室温下，用PBS中1X浓度的StrandBrite RNA Green（组分A）孵育细胞15-30分钟。注意：建议增加标记浓度或孵育时间，以使染料在细胞未充分染色的情况下积累。有关详细信息，请参见图1。
4.（可选）用PBS洗涤细胞1-2次，然后向每个孔中加入100 µL PBS。
5.使用荧光显微镜在Ex / Em = 490/520 nm（FITC通道）上监控荧光强度。

图1. HeLa细胞中RNA染色的荧光图像。 （A）使用Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒（绿色，目录号22630）对活细胞染色，并用Hoechst 33342（蓝色，目录号17530）复染。 （B）使用相同试剂盒将固定在甲醇中的细胞染色。 （C）染色后，将固定的HeLa细胞与0.5 mg / mL RNase在37ºC下孵育1小时。 RNase消化测试的图像表明StrandBrite RNA Green具有很高的选择性。 使用带有FITC滤光片的荧光显微镜测量绿色荧光信号。