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- 产品名称:鬼笔环肽-iFluor 532偶联物
- 产品货号:23117
- 产品品牌:AAT Bioquest
简单介绍
鬼笔环肽-iFluor 532偶联物这一橙色荧光鬼笔环肽轭合物(相当于Alexa Fluor532标记的鬼笔环肽)选择性的链接纤维状肌动蛋白,鬼笔环肽-iFluor 532偶联物在毫微摩尔级鬼笔环肽衍生物用于标记、识别 和 测量甲酚甲醛树脂固定的纤维状肌动蛋白 、组织切片、 细胞培养物或者细胞实验是方便探索的。
产品描述
鬼笔环肽-iFluor 532标记
货号 | 23117 | 存储条件 | F/L |
规格 | 300 Tests | 价格 | |
Ex (nm) | 536 | Em (nm) | 560 |
分子量 | ~1800 | 溶剂 | DMSO |
产品详细介绍 |
鬼笔环肽-iFluor 532标记探针会选择性地结合F-肌动蛋白。以纳摩尔浓度使用,鬼笔环肽衍生物是方便的探针,用于标记,鉴定和定量甲醛
固定和透化组织切片中的F-肌动蛋白,细胞培养物或无细胞实验。肌动蛋白是一种球状的,大约42kDa的蛋白质,几乎存在于所有真核细胞中。 它也是*高
度保守的蛋白质之一,与藻类和人类不同的物种相差不超过20%。 肌动蛋白是细胞中两种细丝的单体亚基:微丝,细胞骨架的三个主要组分之一,以及微丝
,是肌细胞中收缩装置的一部分。因此,肌动蛋白参与许多重要的细胞过程,包括肌肉收缩,细胞运动,细胞分裂和胞质分裂,囊泡和细胞器运动,细胞信
号传导,以及细胞连接和细胞形状的建立和维持。
鬼笔环肽比肌动蛋白单体更紧密地结合肌动蛋白丝,导致肌动蛋白亚基从丝状末端解离的速率常数降低,基本上通过防止丝解聚来稳定肌动蛋白丝。
此外,发现鬼笔环肽抑制F-肌动蛋白的ATP水解活性。鬼笔环肽在细胞中以不同浓度起作用不同。当以低浓度引入细胞质时,鬼笔环肽将较少聚合形式的细
胞质肌动蛋白以及微丝蛋白聚集成聚集的肌动蛋白聚合物的稳定“岛”,但它不会干扰应力纤维,即厚的微丝束。鬼笔环肽的性质是通过用荧光类似物标记鬼
笔环肽并用它们染色肌动蛋白丝用于光学显微镜来研究F-肌动蛋白在细胞中的分布的有用工具。鬼笔环肽的荧光衍生物已经证明在定位活细胞或固定细胞中
的肌动蛋白丝以及在体外可视化单个肌动蛋白丝方面非常有用。荧光鬼笔环肽衍生物已被用作高分辨率肌动蛋白研究中的重要工具。 鬼笔环肽-iFluor 532标
记探针是AAT Bioquest为多色成像应用提供的一种荧光鬼笔环肽衍生物。
产品光谱图
产品说明书样品分析方案
概述
在微孔板孔中制备样品
从板中的样品中取出液体
添加鬼笔环肽-iFluor 532溶液(100μL/孔)
在室温下染色细胞20至90分钟
清洗细胞在显微镜下检查样品
注意:将小瓶加热至室温并在打开前短暂离心。
操作步骤
1.制备1000 X鬼笔环肽DMSO储备液:将30μLDMSO加入粉末形式的小瓶中。
2.制备1X鬼笔环肽结合物工作溶液:加入1μL1000X鬼笔环肽结合物DMSO溶液至1 mL含1%BSA的PBS。
注意1:鬼笔环肽结合物的未使用的1000X DMSO储备溶液应等分并储存在-20℃,避光。
注意2:不同的细胞类型可能染色不同。 应相应地制备鬼笔环肽结合物工作溶液的浓度。
3.染色细胞:
3.1执行甲醛固定。 在室温下将含3.0-4.0%甲醛的细胞在PBS中孵育10-30分钟。
注意:避免使用任何含甲醇的固定剂,因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。 优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。
3.2用PBS冲洗固定的细胞2-3次。
3.3可选:在PBS中加入0.1%Triton X-100固定细胞(步骤2.2)3至5分钟,以增加渗透性。 用PBS冲洗细胞2-3次。
3.4将100μL/孔(96孔板)鬼笔环肽缀合物工作溶液(来自步骤1)加入固定的细胞(来自步骤2.2或2.3),并在室温下染色细胞20至90分钟。
3.5用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以除去过量的鬼笔环肽结合物,然后在显微镜下进行,密封和成像
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