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- 产品名称：AAT Bioquest 活细胞荧光示踪探针FDA荧光素二乙酸CAS:596-09-8
- 产品货号：22020
- 产品品牌：AAT Bioquest
简单介绍
AAT Bioquest 活细胞荧光示踪探针FDA荧光素二乙酸CAS:596-09-8FDA是一种非荧光性疏水性荧光素衍生物，它可以穿透细胞膜进入细胞，通过细胞内酯酶催化水解二乙酸酯基团产生具有高强度的荧光产物荧光素。荧光分子在具有完整细胞膜的细胞内积累，因此这种绿色荧光可以作为一种细胞活力的标签。AAT Bioquest 活细胞荧光示踪探针FDA荧光素二乙酸CAS:596-09-8很受欢迎。
产品描述
活细胞荧光示踪探针FDA[荧光素二乙酸盐]
| 货号 | 22020 | 存储条件 | F/L |
| 规格 | 1 g | ||
| Ex (nm) | 494 | Em (nm) | 521 |
| 分子量 | 416.38 | 溶剂 | DMSO |
| 产品详细介绍 | |||
活细胞荧光示踪探针FDA[荧光素二乙酸盐]是美国AAT Bioquest生产的用于检测活细
胞的荧光探针，FDA（荧光素二乙酸酯）是一种非荧光疏水性荧光素衍生物，可以通过细胞膜
（包括哺乳动物和**细胞），因此细胞内酯酶水解产生高荧光产物荧光素的二乙酸酯基团。
荧光素分子在具有完整膜的细胞中积累，作为细胞活力的标记。不具有完整细胞膜或活性代谢
的细胞可能不会积聚荧光产物，因此不会表现出绿色荧光。FDA可以与PI染色组合使用，因为
非活细胞摄取PI并将死细胞染成红色，而活细胞不吸收PI并且应该仅染色绿色。与单色分析相
比，非活细胞和活细胞的这种双色分离可以提供更准确的细胞活力定量。金畔生物是AAT
Bioquest的中国代理商，为您提供*上等的活细胞荧光示踪探针FDA[荧光素二乙酸盐]。
产品光谱图 
样品分析方案
概述
用测试化合物制备细胞添加1到20μMFDA工作溶液
用细胞孵育染料
在室温或37℃下保持15至30分钟取出染料工作溶液
使用Ex / Em = 490/520 nm（FL1通道）的流式细胞仪进行分析
注意：以下是推荐的方案。 它只提供了一个指导方针，实际情况应根据具体需要进行修改。
操作步骤
1.准备2-10 mM DMSO储备溶液
将4.2mg溶于1ml DMSO中以制备10mM储备溶液（1mg / ml相当于~2.4mM）
注意：应立即使用原液; 应将任何剩余的溶液等分并在<-20℃冷冻。 避免反复冻融循环
，避免光照。
2.准备染料工作溶液
在使用之前，通过用Hanks和20mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（pH7）稀释步骤
1中的DMSO储备溶液，准备1至20μM染料工作溶液。通过涡旋混合均匀。
3.用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞：
3.1用测试化合物细胞培养一段所需的时间。
3.2离心细胞，每管2-10×105个细胞。
3.3在500μL染料工作溶液中重悬细胞（来自步骤2）。
3.4在室温或37°C下用染料溶液孵育细胞15至30分钟，避光。
3.5从细胞中取出染料工作溶液，用HHBS或您选择的缓冲液清洗细胞。 将细胞重悬于500μ
L预热的HHBS或培养基中，得到每管2-10×105个细胞。
3.6用流式细胞仪（FL1通道）或荧光显微镜观察Ex / Em = 490 / 520nm处的荧光变化。
注意：对于**细胞染色：当通过测试**过夜生长预处理的营养肉汤中1：800稀释储备溶
液时，染色是*有效的，但也可以使用新鲜营养肉汤或PBS。 **悬浮液应用PBS稀释至每毫
升105-107个生物。 可以通过将1ml溶液施加到.45μm过滤器（25mm）并真空过滤除去溶液，
然后加入1ml染料溶液并在室温下孵育5-10分钟来染色**。