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- 产品名称:钙离子荧光探针Indo-1, AM
- 产品货号:21036
- 产品品牌:AAT Bioquest
简单介绍
钙离子荧光探针Indo-1, AM
产品描述
钙离子荧光探针Indo-1, AM
货号 | 21036 | 存储条件 | f/l |
规格 | 20×50 ug | 价格 | |
Ex (nm) | 342 | Em (nm) | 447 |
分子量 | 1009.91 | 溶剂 | DMSO |
产品详细介绍 |
简要概述
钙离子荧光探针Indo-1, AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针,在许多生物学研究中钙离子的测定非常重要。在与钙离子结合的条件下,荧光探针显现出光谱响应,这使研究者可以通过利用荧光显微镜、流式细胞仪、荧光分光镜和荧光分光仪等来研究细胞内部游离的Ca2+浓度的变化。在众多易受UV(紫外光)激发的钙离子指示剂中,Fura-2和Indo-1是*常使用的。当Indo-1 按比率发射时,Fura-2能按比例激发。Fura-2在按比例成像显微检测法中使用,在这里改变激发波长与改变发射光波长更有实用性。在与Ca2+结合的条件下,通过扫描300~400nm 的激发光谱发现Fura-2光吸收发生改变,当时监测到发射光在510 nm处。相对地,Indo-1在流式细胞术中作为染料使用,在这里用单一的激光器激发更有实际意义(通常使用光谱线位移在351?64 nm的氩离子激光器)。Indo-1的发射光从无游离Ca2+环境下的480nm转移到400 nm处(当与Ca2+)。Indo-1 AM是Indo-1的一种具有细胞渗透性的形式。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供上等的钙离子荧光探针。
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产品说明书
操作说明
1.准备HHBS缓冲液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。
2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *储备液。
2.1Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *使用量:1 mg
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *与495.09μL无水DMSO混合。
3.使用10μMIndo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 * 4在HHBS中制备2X工作溶液,0.08%Pluronic®F-127和2mM Probenecid。
3.1*终孔内浓度为Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *:5μM
3.2Pluronic®F-127的*终井内浓度:0.04%
3.3*终孔内浓度的丙磺舒:1mM
3.4在合适的容器中混合16μLIndo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *,25.6μL10%Pluronic®F-127,和256μL25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 mL。
注意:对于大多数细胞系,我们建议*终浓度为Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *为4至5μM。
注意:推荐的Pluronic F-127井浓度*终为0.02%至0.04%。
注意:推荐的*终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的*终浓度调节至以下:5μMIndo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *,0.04%Pluronic®F-127,1mM丙磺舒。
5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为4 mL。
7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。
8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 346/475 nm运行实验。