鬼笔环肽-iFluor633标记AlexaFluor优异替代品 货号:23125-AAT Bioquest荧光染料

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  • 产品名称:鬼笔环肽-iFluor633标记AlexaFluor优异替代品
  • 产品货号:23125
  • 产品品牌:AAT Bioquest

简单介绍

鬼笔环肽-iFluor 633标记探针会选择性地结合F-肌动蛋白。以纳摩尔浓度使用,鬼笔环肽衍生物是方便的探针,用于标记,鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片中的F-肌动蛋白,细胞培养物或无细胞实验。

产品描述

笔环肽-iFluor 633标记 鬼笔环肽-iFluor633标记AlexaFluor优异替代品  货号:23125   
货号                          23125                           存储条件                      F/L                                      
规格 300 Tests
Ex (nm) 634 Em (nm) 649
分子量 1703.99 溶剂 DMSO
产品详细介绍

鬼笔环肽-iFluor 633标记探针会选择性地结合F-肌动蛋白。以纳摩尔浓度使用,鬼笔环肽衍生物是

方便的探针,用于标记,鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片中的F-肌动蛋白,细胞培养物或无细胞实验。

肌动蛋白是一种球状的,大约42kDa的蛋白质,几乎存在于所有真核细胞中。 它也是*高度保守的

蛋白质之一,与藻类和人类不同的物种相差不超过20%。 肌动蛋白是细胞中两种细丝的单体亚基:

微丝,细胞骨架的三个主要组分之一,以及微丝,是肌细胞中收缩装置的一部分。 因此,肌动蛋白

参与许多重要的细胞过程,包括肌肉收缩,细胞运动,细胞分裂和胞质分裂,囊泡和细胞器运动,

细胞信号传导,以及细胞连接和细胞形状的建立和维持。

        鬼笔环肽比肌动蛋白单体更紧密地结合肌动蛋白丝,导致肌动蛋白亚基从丝状末端解离的

速率常数降低,基本上通过防止丝解聚来稳定肌动蛋白丝。此外,发现鬼笔环肽抑制F-肌动蛋白的

ATP水解活性。鬼笔环肽在细胞中以不同浓度起作用不同。当以低浓度引入细胞质时,鬼笔环肽将较

少聚合形式的细胞质肌动蛋白以及微丝蛋白聚集成聚集的肌动蛋白聚合物的稳定“岛”,但它不会

干扰应力纤维,即厚的微丝束。鬼笔环肽的性质是通过用荧光类似物标记鬼笔环肽并用它们染色肌

动蛋白丝用于光学显微镜来研究F-肌动蛋白在细胞中的分布的有用工具。鬼笔环肽的荧光衍生物已

经证明在定位活细胞或固定细胞中的肌动蛋白丝以及在体外可视化单个肌动蛋白丝方面非常有用。

荧光鬼笔环肽衍生物已被用作高分辨率肌动蛋白研究中的重要工具。 鬼笔环肽-iFluor 633标记探

针是AAT Bioquest为多色成像应用提供的一种荧光鬼笔环肽衍生物。

产品光谱图 鬼笔环肽-iFluor633标记AlexaFluor优异替代品  货号:23125

产品说明书

样品分析方案

概述

在微孔板孔中制备样品

从板中的样品中取出液体

添加鬼笔环肽-iFluor 633溶液(100μL/孔)

在室温下染色细胞20至90分钟

清洗细胞在显微镜下检查样品

注意:将小瓶加热至室温并在打开前短暂离心。

 

操作步骤

1.制备1000 X鬼笔环肽DMSO储备液:将30μLDMSO加入粉末形式的小瓶中。

2.制备1X鬼笔环肽结合物工作溶液:加入1μL1000X鬼笔环肽结合物DMSO溶液至1 mL含1%BSA的PBS。

注意1:鬼笔环肽结合物的未使用的1000X DMSO储备溶液应等分并储存在-20℃,避光。

注意2:不同的细胞类型可能染色不同。 应相应地制备鬼笔环肽结合物工作溶液的浓度。

3.染色细胞:

3.1执行甲醛固定。 在室温下将含3.0-4.0%甲醛的细胞在PBS中孵育10-30分钟。

注意:避免使用任何含甲醇的固定剂,因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。 优选的固定剂是不

含甲醇的甲醛。

3.2用PBS冲洗固定的细胞2-3次。

3.3可选:在PBS中加入0.1%Triton X-100固定细胞(步骤2.2)3至5分钟,以增加渗透性。 用PBS

冲洗细胞2-3次。

3.4将100μL/孔(96孔板)鬼笔环肽缀合物工作溶液(来自步骤1)加入固定的细胞(来自步骤2.2

或2.3),并在室温下染色细胞20至90分钟。

3.5在加上盖玻片之前,用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以除去过量的鬼笔环肽结合物,然后在显微镜下

进行,密封和成像。

Afl II酶试剂盒Takara Clontech

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品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 1236A Afl II 200 U ¥454
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■ 识别位点
Afl II
 
■ 制品内容
□ 酶浓度 10 U/μl
□ 附带缓冲液  
     反应缓冲液 M+BSA
     反应停止液 10×Loading Buffer
 
■ 制品说明
□ 起源 Escherichia coli carrying the plasmid encoding Afl II gene
□ 反应温度 37℃
□ 活性测定用底物 λ DNA
□ Ligation-Recutting Test 因该酶切出的突出末端比一般的4个碱基突出末端的连接效率低,所以必须使用平滑末端的连接条件。
□ Star活性: 高甘油浓度、DMSO存在、Mn2+存在条件下,识别序列会发生变化。
 
 

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QuickCut™ Afl II酶试剂盒Takara Clontech

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QuickCut Afl II
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Takara 1602 QuickCut Afl II 100 Rxns ¥200
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QuickCut™ Afl II QuickCut™ Afl II QuickCut™ Afl II QuickCut™ Afl II QuickCut™ Afl II
 
QuickCut™ Afl II
QuickCut™ Afl II  
QuickCut™ Afl II
 
 
■ 识别位点
QuickCut™ Afl II
 
■ 制品内容
□ 附带缓冲液  
     10X QuickCut Buffer 500 μl×2
     10X QuickCut Green Buffer 500 μl×2
 
■ 制品说明
□ 起源:Escherichia coli carrying the plasmid encoding Afl II gene
□ 反应温度:37℃
□ 活性测定用底物:λ DNA
□ 活性测定:1 μl QuickCut限制酶在50 μl 1X QuickCut Buffer或1X QuickCut Green Buffer的反应体系中,在37℃条件下,经过5 min反应,将1 μg λ DNA完全消化所需要的酶量。
□ 使用注意:
1) 因该酶切出的突出末端比一般的4个碱基突出末端的连接效率低,所以必须使用平滑末端的连接条件。
2) 不建议进行16 hr以上酶切,易导致星活性。
3) 使用QuickCut限制酶进行双酶切或多酶切反应时,加入限制酶的总体积不能超过反应体系的1/10量;如果各酶的反应温度不同,建议按低温到高温的顺序加入相应的QuickCut限制酶进行分步酶切反应。
4) 10X QuickCut Green Buffer可能会干扰酶切产物的荧光分析。因此,酶切产物荧光分析检测时推荐使用无色的10X QuickCut Buffer。
5) 10X QuickCut Green Buffer如出现沉淀,室温下振荡5分钟可使沉淀完全溶解,不影响使用。
 
 
 

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