AAT Bioquest Fluorimetric Renin Assay Kit，它可以介导胞外体积和动脉血管的收缩。它调节血压和电解质平衡。血管紧张素II可诱导血管压缩并导致血压升高。它也能增加ADH和醛固酮的分泌，刺激下丘脑来激活饥渴反应。AAT Bioquest Fluorimetric Renin Assay Kit，很受欢迎。

Amplite 荧光法肾素检测试剂盒 红色荧光

        Amplite 荧光法肾素检测试剂盒 红色荧光 是美国AAT Bioquest生产的用于β-半乳糖苷酶的试剂盒，肾素是一种酶，参与人体的肾素-血管紧张素系统（RAS），介导细胞外体积和动脉血管收缩。它调节血压和电解质的稳态。血管紧张素II收缩血管，导致血压升高。它还会增加ADH和醛固酮的分泌，并刺激下丘脑激活口渴反射。肾素-血管紧张素系统过度活跃会导致血管收缩以及钠和水的滞留。肾素已被确定为**高血压的有吸引力的靶标。 Amplite 肾素检测试剂盒使用我们专有的Tide Fluor 3（TF3）/ Tide Quencher 3（TQ3）荧光共振能量转移（FRET）肽，为高通量筛选肾素抑制剂和肾素活性提供了便捷的检测方法。在FRET肽中，TF3的荧光被TQ3淬灭。通过肾素裂解为两个单独的片段后，TF3的荧光得以恢复，荧光信号可以通过荧光酶标仪轻松监测。该测定法比基于EDANS / DABCYL的测定法灵敏度高约五十倍。借助Amplite 肾素检测试剂盒，我们在100 µL反应体积中检测到低至1ng的肾素。但是，试剂盒中使用的肾素底物的选择性尚未经过彻底测试。由于基于肽的蛋白酶底物通常具有低选择性，因此它也可能对其他蛋白酶有反应。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供上等的Amplite 荧光法肾素检测试剂盒 红色荧光 。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.添加适当的对照或测试样品（50 µL）
2.加入Renin Red 底物工作溶液（50 µL）
3.在37°C的培养箱中孵育30-60分钟（用于终点读数）
4.监测Ex / Em = 540/590 nm的荧光强度

溶液制备 

1.储备溶液

肾素标准
向487.5 µL的测定缓冲液（组分C）中加入12.5 µL的40 µg / mL肾素标准溶液（组分B），得到1000 ng / mL的Renin标准溶液（Ren7）。 取150 µL 1000 ng / mL Renin标准溶液进行1：3连续稀释，以得到连续稀释的Renin标准液（Ren6- Ren1）。

2.工作溶液

将50μLRenin Red 底物（组分A）添加到5 mL的测定缓冲液（组分C）中，使总体积为5.05 mL。 注意：应立即使用Renin Red 底物。

样品操作及分析

表1.黑色96孔微孔板中肾素标准品和测试样品的布局。 Ren =肾素标准品（Ren1-Ren7，1至1000 ng / mL）; BL =空白对照； TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成。 注意：肾素标准品仅用于阳性对照，不应作为酶活性的定量标准品

1.根据需要准备含有肾素的生物样品。

2.根据表1和表2中提供的布局准备肾素标准品和/或含肾素的测试样品。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

3.如果您正在筛选肾素抑制剂，则将板在酶反应所需的温度（例如25°C或37°C）下预孵育10-15分钟。

4.将50 µL（96孔）或25 µL（384孔）的Renin Red 底物工作溶液添加到样品和测定板的对照孔中。

5.将反应在37°C的培养箱中孵育30至60分钟。

6.使用荧光板读数器在Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 mn）下监控荧光强度。注意：试剂盒中使用的肾素底物的选择性尚未经过彻底测试。由于基于肽的蛋白酶底物通常具有低选择性，因此它也可能对其他蛋白酶有反应。人们可能使用肾素特异性抑制剂进行特异性测试，例如在存在肾素特异性抑制剂的情况下，底物的水解仅是由于非特异性蛋白酶活性。总活性和在肾素特异性抑制剂存在下的活性之间的差异给出了样品中的肾素活性。

对于动力学读数：立即开始测量荧光强度，并每5分钟连续记录数据30至60分钟。

对于终点读数：将反应液在37°C下孵育60分钟或更长时间，如果可能，请避免光照。 然后测量荧光强度。

AAT Bioquest Fluorimetric Proteasome 20S Activity Assay Kit，它包含一个20S的核心结构颗粒和两个19S调节调节基团。所有20S的核心结构颗粒包含四对七聚物环状结构组成两种不同的亚基，alpha亚基是结构亚基。AAT Bioquest Fluorimetric Proteasome 20S Activity Assay Kit。

Amplite 荧光法蛋白酶体20S活性检测试剂盒 绿色荧光

        Amplite 荧光法蛋白酶体20S活性检测试剂盒 绿色荧光 是美国AAT Bioquest生产的蛋白酶检测试剂盒，蛋白酶体的主要功能是通过蛋白水解（一种破坏肽键的化学反应）降解不需要的或受损的蛋白质。蛋白酶体降解途径对于许多细胞过程是必不可少的，包括细胞周期，基因表达的调节和对氧化应激的反应。该途径中*常见的蛋白酶体形式是蛋白酶体26S，一种ATP依赖性蛋白水解复合物，其含有一个20S（700-kDa）核心颗粒结构和两个19S（700-kDa）调节帽。20S核心包含三种主要的蛋白水解活性，包括胰凝乳蛋白酶样，胰蛋白酶样和半胱天冬酶样活性。它负责细胞凋亡，DNA修复，内吞作用和细胞周期控制所涉及的关键蛋白的分解。

        我们的Amplite 荧光蛋白酶体20S分析试剂盒是一种均相荧光分析，可测量与培养细胞中蛋白酶体复合物相关的胰凝乳蛋白酶样蛋白酶活性。该试剂盒使用LLVY-R110作为蛋白酶体活性的荧光指示剂。 蛋白酶体对LLVY-R110的切割产生强绿色荧光R110，其在520-530nm下荧光监测，激发波长为480-500nm。该试剂盒为所有必需组分提供优化的分析方案。该测定是稳定的，并且容易适用于高通量测定以评估蛋白酶体活性或筛选培养细胞或溶液中的抑制剂。可以以方便的96孔和384孔荧光微量滴定板形式进行测定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供上等的Amplite 荧光法蛋白酶体20S活性检测试剂盒。 

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产品说明书

检测方案

概述

用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）

制备细胞加入等体积的蛋白酶体测定溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）

在37°C或室温下孵育至少1小时

监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度

操作方法

以下说明书仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

1.准备细胞：

1.1对于粘附细胞：在生长培养基中以80,000个细胞/孔/ 90L将细胞过夜放置96孔板或对于384孔板放置20,000个细胞/孔/ 20L。

1.2对于非粘附细胞：从培养基中离心细胞，然后将细胞沉淀悬浮在培养基中，培养基为300,000细胞/孔/ 90L，用于96孔poly-D赖氨酸平板或80,000细胞/孔/ 20L用于培养384 -well poly-D赖氨酸板。 在实验之前，在制动器关闭的情况下以800rpm离心板2分钟。

注意：应对每个细胞系进行单独评估，以确定*佳细胞密度。

2.准备蛋白酶体测定加载溶液：

2.1使用前在室温下清洗所有试剂盒组件。

2.2制备400X蛋白酶体LLVY-R110底物储备溶液：将25μLDMSO（组分C）加入到蛋白酶体LLVY-R110底物（组分A）的小瓶中，并充分混合。

2.3制备蛋白酶体测定加载溶液：将25μL400X蛋白酶 LLVY-R110底物储备溶液（来自步骤2.2）加入10mL测定缓冲液（组分B）中，并充分混合。

注意：25μL400X蛋白酶体LLVY-R110底物储备液（来自步骤2.2）和10mL分析缓冲液（组分B）足以用于1个平板。 将未使用的400X 蛋白酶 LLVY-R110底物储备液和分析缓冲液等分并保存在-20℃，避免反复冻融循环。

3.运行蛋白酶体测定：

3.1用PBS或所需缓冲液中的10μL10X测试化合物（用于96孔板）或5μL5X测试化合物（用于384孔板）处理细胞。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相应量的化合物缓冲液。

3.2将细胞板在5％CO2,37℃培养箱中孵育一段所需的时间。

注意：纯蛋白酶体或细胞裂解液可直接用于筛选蛋白酶体抑制剂。

3.3加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的蛋白酶体测定加载溶液（来自步骤2.3）。

3.4将板在37℃或室温下孵育至少1小时（2小时至过夜），避光。

注意：应对每个细胞系进行单独评估，以确定*佳孵育时间。

3.5在Ex / Em = 490 / 525nm处监测荧光强度（顶部读数）。