标签归档：primescript

PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6111A PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit 10 Rxns ￥1,582 PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
收藏产品 加入购物车
 
■ 制品内容 (10 次量)
PrimeScript RTase (200 U/μl) 10 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 10 μl
Oligo(dT)18 Primer (1 μg/μl) 20 μl
Random Primer (9mer) (0.3 μg/μl) 20 μl
5 × 1st Strand Synthesis Buffer 40 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 40 μl
E. coli RNase H/E. coli DNA Ligase Mixture 20 μl
E. coli DNA Polymerase I (20 U/μl) 20 μl
5 × 2nd Strand Synthesis Buffer 300 μl
T4 DNA Polymerase (1 U/μl) 40 μl
RNase free dH2O 600 μl × 2
Control RNA (1 μg/μl)* 5 μl
 
*【Control RNA】
本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段，其DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。Control RNA (约1.4 kb) 是带有30个A碱基的具有poly (A)+尾的RNA。以这种RNA为模板合成的双链cDNA插入到适当的质粒载体中，如果确实为全长的cDNA，那这种质粒便可获得四环素抗性。
 
■ 制品说明
以原核细胞或者真核细胞的mRNA为模板合成cDNA后再进行cDNA的克隆，是分子生物学研究中的一种重要手段。利用这一技术可以容易地进行基因的构造解析和目的蛋白质的表达研究等。
一般来说，cDNA的合成以及cDNA文库的利用方法是：在合成与目的mRNA互补的双链cDNA后，将双链cDNA与细菌或病毒来源的载体进行重组，再将重组体导入细菌或真核细胞内进行复制、扩增cDNA，然后再对cDNA进行解析，或者再进一步进行体外转录或体外翻译等。
本试剂盒主要以来自植物和动物的poly (A)+RNA合成双链DNA 。
本试剂盒主要是以Gubler-Hoffman法为基础构建的，其原理见图1、图2，简要说明如下：
1. 在PrimeScript RTase的作用下，利用Oligo(dT)18 Primer或者Random Primer合成cDNA的第一条链 。
2. 使用E. coli RNase H使DNA-RNA杂合体中的RNA链形成单链切口 (Nick) 。在E. coli DNA Polymerase I 与E. coli DNA Ligase的作用下，RNA链被DNA链置换，合成cDNA的第二条链。
3. 使用T4 DNA Polymerase使双链cDNA片段末端平滑。
 
■ cDNA合成原理图
 
PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
图1 使用Oligo(dT)18 Primer时的cDNA合成
 
 
PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
图2 使用Random Primer时的cDNA合成
 
■ 保存
-20℃。
 
■ Troubleshooting
如果实验不能正常进行，请按照说明书内容确认实验操作，检验以下几点：
1. Control RNA的使用
本试剂盒中的Control RNA (pSP Tet3 Poly(A)+ mRNA) 可以用于对照实验，并确认1st Strand cDNA或2nd Strand cDNA的合成反应是否顺利进行。
2. mRNA的纯度检测
为了能够获得更高的cDNA合成效率，尽可能使用完整的mRNA是非常重要的。在进行cDNA合成反应前，可以通过测定260 nm和280 nm的吸光度 (A260/A280在1.8～2.1是理想值) ，或使用琼脂糖凝胶电泳法对RNA的纯度进行检测。
3. RNase的污染
实验时要注意一定不能在mRNA的样品中混入RNase。实验用的器具、试剂等应尽可能进行高温灭菌处理。操作过程要佩戴手套。
 
 

页面更新：2019-03-08 10:35:16

PrimeScript™ II Reverse Transcriptase酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2690S PrimeScript™ II Reverse Transcriptase 2,000 U ￥300 PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
Takara 2690A PrimeScript™ II Reverse Transcriptase 10,000 U ￥1,282
￥769 		PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
Takara 2690B (A × 4) PrimeScript™ II Reverse Transcriptase 10,000 U × 4 ￥4,617
￥2,770 		PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
Takara 2690C (A × 10) PrimeScript™ II Reverse Transcriptase 10,000 U × 10 ￥10,895
￥6,537 		PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

收藏产品 加入购物车

Primescript – Amresco官网 – Page 2

 
 
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase → PrimeScript™ II Reverse Transcriptase → PrimeScript™ II Reverse Transcriptase → PrimeScript™ II Reverse Transcriptase → PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
 
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase  
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
 
 
■ 制品内容 (Code No.: 2690A)
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase (200 U/μl) 10,000 U
5X PrimeScript II Buffer 500 μl
 
■ 制品说明
PrimeScript II Reverse Transcriptase在42℃条件下能够有效地合成低背景、高质量的cDNA，无需进行高温反转录反应，高温的反转录反应会导致RNA的降解，且由于引物的有效使用和辅助蛋白质的添加，避免了因RNA二级结构对cDNA合成的抑制及RT引物错配引起的非特异性延伸。辅助蛋白质完全抑制了由于反转录酶冰上放置引起的非特异性延伸反应，因此，即便是反应液配制到反转录反应开始要间隔一段时间，也不会抑制长链cDNA的合成。合成的cDNA可以广泛应用于2nd-strand合成、杂交、终点PCR和定量PCR，而且本酶特别适用于全长cDNA文库构建用的高质量cDNA合成等。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Purified from an E. coli strain expressing a recombinant enzyme.
 
■ 活性定义
以poly (rA) ·oligo (dT)12-18 为模板/引物，在37℃的条件下，10分钟内掺入1 nmol [3H] dTTP所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
■ 用途
1st-Strand cDNA的合成。
·cDNA Probe的制备。
·RT-PCR。
 
 

页面更新：2021-02-09 14:17:53

PrimeScript™ Reverse Transcriptase酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

PrimeScript™ Reverse Transcriptase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2680Q PrimeScript™ Reverse Transcriptase 2,000 U ￥271 PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase
Takara 2680A PrimeScript™ Reverse Transcriptase 10,000 U ￥1,162 PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase
Takara 2680B (A × 4) PrimeScript™ Reverse Transcriptase 10,000 U × 4 ￥4,165 PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase
Takara 2680C (A × 10) PrimeScript™ Reverse Transcriptase 10,000 U × 10 ￥9,833 PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase
收藏产品 加入购物车

Primescript – Amresco官网 – Page 2

 
 
PrimeScript™ Reverse Transcriptase → PrimeScript™ Reverse Transcriptase → PrimeScript™ Reverse Transcriptase → PrimeScript™ Reverse Transcriptase → PrimeScript™ Reverse Transcriptase
 
PrimeScript™ Reverse Transcriptase
PrimeScript™ Reverse Transcriptase  
PrimeScript™ Reverse Transcriptase
 
 
■ 制品内容 (Code No.: 2680A)
PrimeScript™ Reverse Transcriptase (200 U/μl) 10,000 U
5X PrimeScript Buffer 500 μl
 
■ 制品说明
PrimeScript Reverse Transcriptase是Takara公司依据M-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus)来源的RTase开发的一种反转录酶。本酶具有很强的延伸能力，能够有效地合成1st-strand cDNA，即使对有复杂二级结构的RNA，在42℃条件下也能得到良好的反应效果，无需进行高温反转录反应，高温的反转录反应会导致RNA的降解。本酶适合于长链cDNA的合成及高比例的全长cDNA文库的构建等。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
E. coli carrying the plasmid that encodes reverse transcriptase gene.
 
■ 活性定义
以poly (rA)·oligo (dT)12-18 为模板/引物，在37℃的条件下，10分钟内掺入1 nmol [3H] dTTP所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
■ 用途
1. 1st-Strand cDNA的合成。
2. cDNA Probe的制备。
3. RT-PCR。
 
 

页面更新：2019-10-12 11:50:38