金畔生物为您提供上等荧光探针

Amplite 荧光法葡萄糖-6-磷酸检测试剂盒

        Amplite 荧光法葡萄糖-6-磷酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测鞘磷脂的试剂盒，葡萄糖-6 – 磷酸（ G6P ）是用于葡萄糖到细胞转运的关键中间体。 G6P也可在肝脏和肌肉中转化为糖原或淀粉进行存储。 G6P是由葡萄糖-6 – 磷酸脱氢酶（ G6PD）用来生成在NADPH形式的还原当量。其中G6PD缺乏引起的溶血性贫血。 AAT Bioquest的Amplite 荧光葡萄糖-6 – 磷酸检测试剂盒提供了用于生物样品如血清，血浆，以及细胞培养样品中检测G6P一种简单，灵敏，快速的基于荧光的方法。在偶联酶测定中， 比例是专门由一个荧光NADPH传感器监测。荧光信号可以通过荧光酶标仪在EX/ EM = 530-570 nm/590-600纳米读取（建议EX / EM = 540 nm/590 nm建议）。Amplite G6P测定试剂盒，我们能够检测少至0.3 μM G6P在100微升反应体积。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供上等的Amplite 荧光法葡萄糖-6-磷酸检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备G6P工作溶液（50 µL）
2.添加G6P标准品或测试样品（50 µL）
3.在室温下孵育30分钟-2小时
4.监测Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）的荧光增加

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 NADP储备溶液（100X）：
在NADP小瓶（组分C）中加入100 µL H2O，制成100X NADP储备溶液。

1.2 G6P标准溶液（100 mM）：
将100 µL H2O或1x PBS缓冲液加到G6P标准品（组分D）的小瓶中，制成100 mM G6P标准品溶液。

2.标准溶液

G6P标准
将10 µL 100 mM G6P标准溶液加到990 µL 1x PBS缓冲液中，生成1 mM G6P标准溶液。 然后，将100 µL 1 mM G6P标准溶液添加到900 µL 1 x PBS缓冲液中，制成100 µM G6P标准溶液（G6P7）。 取100 µM G6P标准溶液（G6P7）并进行1：3连续稀释，以使用1x PBS缓冲液连续稀释G6P标准溶液（G6P6- G6P1）。注意：稀释的G6P标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

3.工作溶液

3.1将5 mL测定缓冲液（组分B）加入一瓶酶探针（组分A）中，并充分混合。

3.2将50 µL 100X NADP储备溶液添加到组分A + B的瓶子中，并充分混合以制成G6P工作溶液。 注意：此G6P工作溶液足以用于一个96孔板。

样品操作及实验分析

表1.黑色96孔微孔板中G6P标准品和测试样品的布局。 G6P = G6P标准品（G6P1-G6P7，0.14至100 µM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局，准备G6P标准品（G6P），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.在G6P标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL G6P工作溶液，以使G6P测定总体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL G6P工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。

3.避光保存，室温下孵育反应30分钟至2小时。

4.使用荧光板读数器在激发= 530-570 nm，发射= 590-600 nm（*佳Ex / Em = 540/590 nm，截止= 570nm）下监测荧光的增加。 注意：该板的内容物也可以转移到白色透明底板上，并通过吸光度酶标仪以A575nm / A605nm的比率进行读取。 与荧光读数相比，吸收检测的灵敏度较低。

金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供上等的Amplite 荧光法丙。酮酸检测试剂盒。

Amplite Fluorimetric Pyruvate Assay Kit

        Amplite 荧光法Fluorimetric Pyruvate Assay Kit是美国AAT Bioquest生产的用于检测丙.酮酸的试剂盒，丙。酮酸是细胞内代谢途径中的重要化合物。它来源于称为糖酵解的葡萄糖代谢。一分子葡萄糖分解成两个丙。酮酸分子，通过两种方式之一提供活细胞能量。当氧气存在时（有氧呼吸），丙。酮酸被丙。酮酸脱氢酶转化为乙酰-CoA，丙。酮酸脱氢酶进入柠檬酸循环（也称为三羧酸循环）产生ATP。当氧气不足时，丙。酮酸盐会厌氧分解，在动物体内产生乳酸盐，在植物和微生物体内产生乙醇。丙。酮酸盐的异常水平或乳酸盐与丙。酮酸盐的浓度比可能与肝脏**或代谢紊乱有关，并且是患者临床和其他实验室研究中的一种诊断测量。 AAT Bioquest的Amplite 比色丙。酮酸测定试剂盒提供了一种灵敏的比色测定法，用于定量样品中的丙。酮酸。它利用释放过氧化氢的酶偶联反应，可通过吸光度酶标仪在575 nm处通过丙。酮酸盐传感器检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供上等的Amplite 荧光法丙。酮酸检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备测试样品（50 µL）以及连续稀释的丙。酮酸标准液（50 µL）
2.加入等体积的丙。酮酸工作溶液（50 µL）
3.在室温下孵育30分钟至1小时
4.监测Ex / Em = 540/590 nm的荧光强度

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Quest Fluor 丙。酮酸传感器储备溶液（200X）：
将55 µL DMSO（组分E）添加到Quest Fluor 丙。酮酸传感器（组分A）中，制成200X Quest Fluor 丙。酮酸传感器储备溶液。

1.2 丙。酮酸标准溶液（1 mM）：
将10 µL 100 mM丙。酮酸盐（组分D）添加到990 µL PBS（pH 7）中，得到1 mM丙。酮酸盐溶液。

2.标准溶液

丙。酮酸标准
将100 µL的1 mM丙。酮酸标准溶液加入900 µL PBS中制成100 µM丙。酮酸溶液（PS7）。 然后执行1：3连续稀释以获得连续稀释的丙。酮酸标准品（PS6-PS1）。

3.工作溶液

3.1 将5 mL测定缓冲液（组分C）加入一瓶酶混合1瓶（组分B1）中； 混合均匀。

3.2 将100μLddH₂O加入一个酶混合物2小瓶（组分B2）中； 混合均匀。

3.3 将整个小瓶（100μL）的Enzyme Mix 2和25 uL的200X Quest Fluor 丙。酮酸传感器储备溶液转移到Enzyme Mix 1瓶中。 混合均匀。 注意：丙。酮酸工作溶液不稳定，应立即使用，避免光照。

样品操作及实验分析

表1.黑色96孔微孔板中丙。酮酸标准品和测试样品的布局。 PS =丙。酮酸标准溶液（PS1-PS7，0.1至100 µM）； BL =空白对照； TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和表2提供的布局，将丙。酮酸标准液（PS），空白对照（BL）和测试样品（TS）制备成黑色的96孔微孔板。对于384孔板，请使用25 µL 每孔试剂，而不是50 µL。

2.在丙。酮标准液，空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL丙。酮酸工作溶液，使丙。酮酸测定总体积为100 µL /孔。 对于384孔板，请向每个孔中添加25 µL工作溶液，总体积为50 µL /孔。 在6.5至7.0的pH值下运行丙。酮酸盐测定。

3.将反应混合物在室温下孵育30分钟至1小时。

4.使用荧光板读数器在Ex / Em = 540/590 nm（截止：570 nm）下监测荧光的增加。