Roche DIG-High Prime DNA Labeling and Detection S

产品名称: 罗氏digaoxin标记检测试剂盒KitI
产品货号: 11745832910
产品规格: 12LR;24DR 12次标记+24次检测/盒
Roche DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I

Roche 11745832910 DIG High Prime DNA Labling and Detection Starter 罗氏digaoxin标记检测试剂盒

罗氏Roche总部位于瑞士巴塞尔,是在医药和诊断领域,致力于研究并处位之一的保健集团。罗氏的诊断部门提供duyiwuer产品品种,为*的研究人员、医师、病人、医院和实验室提供多样化的创新测试产品及服务。罗氏诊断在有近19,000人员正致力于科研、发展、产品的市场运作和服务以及一体化的解决方案。

Roche  DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I

产品名称: 罗digaoxin记检测试剂盒KitI

英文名称: DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I
产品货号: 11745832910

产品规格: 12LR;24DR 12次标记+24次检测/盒

产品描述 :灵敏度和特异性:标准分析使用1µg线性化pBR328。通常情况下,标记1小时后0.8微克标记DNA,20小时反应后2.3微克标记DNA。

罗氏digaoxin标记DNA和检测试剂盒I的高效digaoxin( DIG )标记探针可应用于RNA杂交、DNA杂交、 点杂交分析等,同时也可用于克隆和噬菌斑杂交。试剂盒使用DIG-11-dUTP (碱不稳定性)随机引物标记DNA模板并对引物标记杂交物进行显色检测。

在斑点杂交中,经过16小时的显色(探针浓度为20 ng/ml)后,可检测到0.1 pg的同源DNA。

一个单拷贝人类基因(tPA)在Southern印迹中检测到,装载1µg消化胎盘DNA。

Roche公司现为用户提供一种新的DIG标记及检测试盒DIG High Prime DNA Labeling and Detection Kit I。与原有的DIG DNA Labeling and Detection kit(Cat.1093657)比较,本产品有以下特点:

●能对10×10cm印迹膜作12个标记反应及24个显色检测反应,是DIG DNA Labeling and Detection Kit(Cat.1093657)份量的一半,所以特别适合初用者及需处理较少量样品的用户使用。
●试剂盒采用的是DIG高效标记试剂(Cat.1585606),其标记效率是标准DIG随机引物标记法的3-10倍,而且预混了标记需要的所有试剂,即开即用,令操作更简单和方便。
●试剂盒中还包括了DIG定量/对照试纸条,令您能在30分钟内只用小量试剂便可估计DIG标记探针的浓度,方便您取得理想的信噪比。
●用于显色的NBT/BCIP底物为预混的浓缩度,而封闭液则以10倍浓度形式供应,简化了操作程序。

高素数标记法有许多优点。质粒、cosmid和lambda噬菌体DNA都被用作模板。当标记10 ng到3µg模板DNA时,我们获得了同样的效率,模板DNA可以是线性的,也可以是超螺旋的。

DIG-High-Prime DNA标记和检测起始试剂盒I使用digaoxin素(DIG),一种甾体半抗原,标记DNA探针用于杂交和随后通过酶免疫分析进行颜色检测。该试剂盒含有现成的封闭溶液,即硝基四氮唑(NBT)/5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸(BCIP)和DIG-Easy Hyb颗粒的混合储备溶液。digaoxin混合液包括稳定的Klenow酶、核苷酸、引物和反应缓冲液,所有这些都在一个方便的试剂中。样品材料可以是:至少100bp的DNApian段、线性化质粒、cosmid或λDNA或超螺旋DNA。“随机引物”DNA标记方法初由Feinberg和Vogelstein开发,其基础是将所有可能序列的寡核苷酸与待标记的变性DNA杂交。输入的DNA作为合成标记DNA的模板,在反应过程中不会被降解,因此可以用这种方法标记少数量的DNA(10ng)。以随机寡核苷酸的3′-OH末端为引物,用Klenow聚合酶合成互补DNA链。用digaoxin标记的改性脱氧核糖核酸三磷酸被并入新合成的互补DNA链中。

我们致力于为您带来更环保的替代产品,这些产品符合绿色化学的12个原则中的一个或多个。本产品设计为更安全的化学品。DIG系统是作为一种灵敏和经济有效的替代品而建立的,用于标记和检测核酸。有许多可用的出版物证明了DIG系统的多功能性,因此使用无线电标记不再是标记杂交DNA的weiyi选择。

应用

DIG High Prime DNA标记和检测起始试剂盒I已用于多种杂交技术:  •南方斑点[1][2]•在北方斑点 •斑点印迹[3] •菌落和菌斑杂交•适用于所有类型的过滤器杂交 •例如,在小麦和大麦基因组中检测到高复杂度的基因 digaoxin标记探针在一小时内或隔夜培养后以高产量产生。

注意:仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

 

DNA残留检测

疫苗的使用除了关注效用,还要注重安全。现在很多疫苗都是用细胞培养的方式生产,比如重组( CHO细胞)乙肝疫苗,Vero细胞狂犬病疫苗等大多数疫苗。如果纯化度不够,疫苗产品中残留宿主细胞DNA和蛋白,可能会造成致癌性等不可预料的后果。

因此在疫苗生产中要随时对DNA残留进行检测,以便知道每个过程除掉DNA残留的能力。通常规定每支疫苗DNA残留不能超过100 pg,也就大约等同于17个甚至更少CHO细胞基因组DNA的含量,对如此微量的DNA残留进行检测所用的技术方法就必须相当敏感和稳定 ,现在对DNA残留定 量的方法主要有以下三种:

  1. 分子杂交技术检测DNA残留。
  2. 2、基于DNA结合蛋白的方法( Threshold immunoassay )检测DNA残留。
  3. 实时定量PCR法检测DNA残留。
  4. Roche  DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I

以下是Roche品牌的部分产品目录,如需其它产品请咨询客服

品牌

货号

名称

应用

规格

Roche

11745832910

DIG High Prime DNA Labling and Detection Starter 1

digaoxin标记DNA和检测试剂盒Ⅰ

12次标记+24次检测/盒

Roche

11585614910

DIG High Prime DNA Labling and Detection Startern

digaoxin标记DNA和检测试剂盒Ⅱ

12次标记+24次检测/盒

 

Roche

6366546001

X-TREMEGENE HP DNA TRANSF. REAG

高转染效率

5 x 1 ml

Roche

4476115001

siRNA Transfection Reagent, 5×1 ml

siRNA 直接及共同转染

5 x 1 ml

Roche

11644807001

细胞增殖试剂WST-1

ELISA方法

2500T

Roche

11699709001

ATP生物发光分析试剂盒HS II

生物发光

1000T

Roche

11810740001

IN SITU CELL PROLIFERATION KIT, FLUOS

荧光显微镜或者流式细胞仪

1000T

Roche

11684795910

In Situ Cell Death fluorescein

TUNEL绿色荧光

50T

Roche

11684817910

In Situ Cell Death POD

TUNELHRP标记

50T

Roche

12156792910

In Situ Cell Death TMR

TUNEL红色荧光

50T

Roche

11988549001

ANNEXIN-V-FLUOS STAINING KIT

早期凋亡,含PI即用型

250T

Roche

4744926001

Cytotoxicity Detection KitPLUS (LDH)

比色法检测

400T

Roche

11644793001

CYTOTOXICITY DETECTION KIT (LDH)

比色法检测

2000T

Roche

11585045001

CELLULAR DNA FRAGMENTATION ELISA

ELISA比色法

500T

Roche

11667165001

TRIPURE ISOLATION REAGENT 200 ML

RNA抽提

EA

Sigma

T9424-200ml

TRI Reagent®

RNA抽提

200ML

Roche

4896866001

Transcriptor cDNA Synth. Kit 1

反转录试剂盒

100 次

Roche

4897030001

Transcriptor cDNA Synth. Kit 2

反转录试剂盒

200 次

Roche

4913914001

FS Universal SYBR Green Master

QPCR试剂

10 x 5 ml

Roche

6924204001

FS Essential DNA Green Master

QPCR试剂

10×5 ml

Roche

6612601001

LightCycler 8-Tube Strips (white)

八连管

10 x 12 根

Roche

4729692001

LightCycler 480 Multiwell Plate96

96孔板

50 块板

Roche

4729749001

LightCycler 480 Multiwell Plate 384

384孔板

50 块板

Roche

11277073910

DIG RNA LABELING MIXTURE, 10X 40 UL

digaoxin(DIG)

EA

Roche

11585614910

DIG HIGH PRIME LAB./DET.KIT II

digaoxin(DIG)

EA

Roche

11745832910

DIG HIGH PRIME LAB/DETECTION KIT I

digaoxin(DIG)

EA

roche-s

4693132001

cOmplete,EDTA-free,EASYpack

蛋白酶抑制剂(不含EDTA)

20*50ML

roche-s

4693159001

cOmplete,Mini,EDTA-free

蛋白酶抑制剂(不含EDTA)

30*10ML

roche-s

4906837001

PhosStop, 20 Tablets

磷酸酶抑制剂

20 Tab.

 

 

DIG Styramide * DIG酪胺* 货号:45305-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称:DIG Styramide * DIG酪胺*
  • 产品型号:45305
  • 产品展商:其它品牌

简单介绍

DIG Styramide * DIG酪胺的优异替代品*

产品描述

DIG Styramide * DIG酪胺的优异替代品*

DIG Styramide * DIG酪胺*  货号:45305

货号 45305 存储条件                  f/l
规格                          100 Slides                                       
Ex (nm) Em (nm)
分子量 840.07 溶剂 DMSO
产品详细介绍

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标*灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有更高效率标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少**抗体的消耗。DIG Styramide是DIG酪胺的优良替代品,后者广泛用于众所周知的酪胺信号放大(TSA)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供上等的DIG Styramide。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的含有Styramide 缀合物的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8 ℃的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2储备溶液:将90 µL的ddH2O加入10 µL 3%过氧化氢中(未提供)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液,做到现用现配。

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需100 µL Styramide 工作溶液,(提供的Styramide 足以进行100次测试。)注意:必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:根据所使用的二抗说明书中的建议配制适当浓度的二级抗体-HRP工作溶液。

3.Anti-DIG抗体工作溶液:按照相应说明书的步骤调配适当浓度的Anti-DIG抗体缀合物工作溶液。 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的*佳孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

DIG标记

1.将100 µL二级抗DIG抗体缀合物工作溶液加到于每个样品中,并在室温下孵育60分钟。

2.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

图示

DIG Styramide * DIG酪胺*  货号:45305

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标*灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

DIG Styramide * DIG酪胺*  货号:45305

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

 

兔抗Dig-HRP(酶标记抗体);现货供应兔抗Dig-HRP(酶标记抗体)

上海金畔生物科技有限公司现货供应兔抗Dig-HRP(酶标记抗体);现货供应兔抗Dig-HRP(酶标记抗体)量大优惠,咨询 :

兔抗Dig-HRP(酶标记抗体);现货供应兔抗Dig-HRP(酶标记抗体)

上海金畔生物科技有限公司供应兔抗Dig-HRP(酶标记抗体);现货供应兔抗Dig-HRP(酶标记抗体)量大优惠,咨询 :         2743691513

货号

产品名称

厂家

规格

价格

NRE29-0.1ml

兔抗Dig-HRP

Jinpan

0.1ml

384

NRE29-0.5ml

兔抗Dig-HRP

Jinpan

0.5ml

1760

NRE29-0.1ml

兔抗大鼠IgG

Jinpan

0.1ml

128

NRE29-0.5ml

兔抗大鼠IgG

Jinpan

0.5ml

560

酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。目前较为常用的是将辣根过氧化物酶(HRP),经过碘酸钠氧化而标记在抗体IgG分子上,而制成HRP一抗体结合物。

本室向用户提供的各类酶标物,均根据本室建立的改良过碘酸钠氧化法标记而成。每种成品已加入一定浓度的BSA作为稳定剂。产品的工作浓度根据方法不用而别,用前-20℃冻存,避免反复化冻。

应用范围:

抗原决定族的抗原性分析鉴定,各种抗原、抗体的定量、定性及定位分析测定等。

工作中易产生的问题:

  1. 包被抗体或抗原不适,易产生阳性值较小,或产生变异,及跳管现象。
  2. 用抗血清不纯化,或纯化程度太低的抗体包被,则阳性值较小,或没有阳性梯度。
  3. 封闭不好或标记物过浓可产生对照较高。

主要性能:

每支0.1ml液体,内含有HPR约200ug/支,IgG约含400ug/支,BSA300ug/支,-20℃保存,稳定一年。4℃保存约3~6个月,1:10稀释,4℃可30天左右。稀释液为:PH7.4PBST。

工作效价:

直接ELISA法:1:5000~10000,1:500~2000,用TMB作底物(OD450nm)P/N=2.5~3.0为阳性。

免疫印迹化:1:200~400 ,免疫组化:1:20~40,斑点免疫1:200~400

货号

产品名称

厂家

规格

价格

NRE1

羊抗人IgA

Jinpan

 

128

NRE2

羊抗人IgM

Jinpan

 

128

NRE3

羊抗人C3

Jinpan

 

128

NRE4

羊抗人纤维蛋白原

Jinpan

 

128

NRE5

羊抗人白蛋白

Jinpan

 

80

NRE6

羊抗人IgG、A、M

Jinpan

 

128

NRE7

兔抗人IgG~F(ab)2

Jinpan

 

128

NRE8

兔抗猴IgG

Jinpan

 

160

NRE9

兔抗豚鼠IgG

Jinpan

 

128

NRE10

兔抗狗IgG

Jinpan

 

128

NRE11-0.1ml(1:500~1000)

羊抗人IgG

Jinpan

0.1ml

80

NRE11-0.1ml

羊抗人IgG

Jinpan

0.1ml

112

NRE11-0.5ml

羊抗人IgG

Jinpan

0.5ml

512

NRE11-1ml

羊抗人IgG

Jinpan

1ml

976

NRE12-0.1ml(1:500~1000)

羊抗兔IgG

Jinpan

0.1ml

80

NRE12-0.1ml

羊抗兔IgG

Jinpan

0.1ml

112

NRE12-0.5ml

羊抗兔IgG

Jinpan

0.5ml

512

NRE12-1ml

羊抗兔IgG

Jinpan

1ml

976

NRE13-0.1ml(1:500~1000)

羊抗小鼠IgG

Jinpan

0.1ml

80

NRE13-0.1ml

羊抗小鼠IgG

Jinpan

0.1ml

112

NRE13-0.5ml

羊抗小鼠IgG

Jinpan

0.5ml

512

NRE13-1ml

羊抗小鼠IgG

Jinpan

1ml

976

NRE14-0.1ml

羊抗大鼠IgG

Jinpan

0.1ml

112

NRE14-0.5ml

羊抗大鼠IgG

Jinpan

0.5ml

512

NRE15-0.1ml

羊抗猪IgG

Jinpan

0.1ml

112

NRE15-0.5ml

羊抗猪IgG

Jinpan

0.5ml

512

NRE15-0.1ml(1:500~1000)

羊抗猪IgG

Jinpan

0.1ml

80

NRE16-0.1ml

羊抗牛IgG

Jinpan

0.1ml

80

NRE17-0.1ml

羊抗马IgG

Jinpan

0.1ml

80

NRE17-0.5ml

羊抗马IgG

Jinpan

0.5ml

352

NRE18-0.1ml

羊抗鸡IgG

Jinpan

0.1ml

80

NRE18-0.5ml

羊抗鸡IgG

Jinpan

0.5ml

352

NRE19-0.1ml

兔抗牛IgG

Jinpan

0.1ml

416

NRE19-0.5ml

兔抗牛IgG

Jinpan

0.5ml

96

NRE20-0.1ml

兔抗鸡IgG

Jinpan

0.1ml

96

NRE20-0.5ml

兔抗鸡IgG

Jinpan

0.5ml

416

NRE21-0.1ml

兔抗马IgG

Jinpan

0.1ml

96

NRE21-0.5ml

兔抗马IgG

Jinpan

0.5ml

416

NRE22-0.1ml

兔抗羊IgG

Jinpan

0.1ml

96

NRE22-0.5ml

兔抗羊IgG

Jinpan

0.5ml

416

NRE22-1ml

兔抗羊IgG

Jinpan

1ml

880

NRE23-0.1ml

兔抗HRP-HRP(PAP)

Jinpan

0.1ml

96

NRE23-0.5ml

兔抗HRP-HRP(PAP)

Jinpan

0.5ml

416

NRE24-0.1ml

BSA-HRP

Jinpan

0.1ml

80

NRE24-0.5ml

BSA-HRP

Jinpan

0.5ml

352

NRE25-0.1ml

人白蛋白-HRP

Jinpan

0.1ml

80

NRE25-0.5ml

人白蛋白-HRP

Jinpan

0.5ml

352

NRE26-0.1ml

兔抗生物素-HRP

Jinpan

0.1ml

288

NRE26-0.5ml

兔抗生物素-HRP

Jinpan

0.5ml

1312

NRE27-0.1ml

兔抗亲和素-HRP

Jinpan

0.1ml

288

NRE27-0.5ml

兔抗亲和素-HRP

Jinpan

0.5ml

1312

NRE28-0.1ml

兔抗FITC-HRP

Jinpan

0.1ml

288

NRE28-0.5ml

兔抗FITC-HRP

Jinpan

0.5ml

1312

NRE29-0.1ml

兔抗Dig-HRP

Jinpan

0.1ml

384

NRE29-0.5ml

兔抗Dig-HRP

Jinpan

0.5ml

1760

NRE29-0.1ml

兔抗大鼠IgG

Jinpan

0.1ml

128

NRE29-0.5ml

兔抗大鼠IgG

Jinpan

0.5ml

560