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Luna® 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液（含 UDG） 收藏
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特性
Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液，含 UDG 可精准检测目标 RNA，多重扩增检测性能优异，一次可检测多达 5 个靶标。
• 单管预混液剂型使反应体系的建立更便捷
• 4X 浓度的预混液可增加样品加入量，提高 RT-qPCR 灵敏度
• 一次可检测多达 5 个靶标，增加检测通量
• Luna 温启动反转录酶与 Taq 热启动 DNA 聚合酶联合使用，提高反应特异性及稳定性并可室温建立体系
• 预混液中包含 UDG 和 dUTP，防止模板残留污染
• 无干扰的可见示踪染料避免加样错误
• 点击 COVID-19 research 了解 NEB 如何将多种 RT-qPCR 病毒检测方法用于新冠研究
产品说明
Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液，含 UDG 用于探针法实时荧光定量检测靶标 RNA。首先反转录酶将 RNA 转化为 cDNA，然后 DNA 聚合酶对 cDNA 进行扩增，完成靶标的实时荧光定量 PCR（qPCR），整个过程在单管内一次性完成。基于探针法的 qPCR / RT-qPCR 原理是利用聚合酶的 5´ → 3´ 外切酶活性，将淬灭的目标特异性探针切断发出荧光，并实时监测荧光值的增加，以测量每个循环中的 DNA 扩增。在荧光信号显著超过背景荧光的位置，可以确定 Cq 值。Cq 值可用于评估两个或多个样品的靶基因相对丰度。
两位实验人员按照操作说明书，在几天的时间内，使用 Applied Biosystems™ QuantStudio™ 6 实时 PCR 系统，用两种荧光定量试剂盒分别对 8 个不同丰度、长度和 GC 含量的靶标（通过不同颜色显示）进行一步法 RT-qPCR 测试。反应结果就以下方面进行评估：扩增效率、低样品量检测能力及无模板扩增值（ΔCq=无模板对照的平均 Cq-最低起始量的平均 Cq）。此外，基于前面的度量值（质量得分）还评估了扩增结果的一致性、可重复性和总体曲线质量。结果显示：参与测试的两种试剂均表现不错，但 NEB 测试结果落在绿框里的数量更多，因此 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液，含 UDG 性能优于 TaqPath 1-Step RT-qPCR预混液。
RT-qPCR 的高灵敏度使得避免 DNA 污染尤为重要。由于先前扩增产物可作为后续反应的底物，因此反应体系加入 dUTP 和热敏 UDG 可防止模板残留污染。热敏 UDG 超过50°C时会完全失活，因此对 qPCR 性能没有影响。
该预混液包含无荧光的可见蓝色示踪染料，有助于透明管加样。该示踪染料与 qPCR 常用荧光基团的光谱没有重叠，也不会干扰实时检测。
Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液，含 UDG 包含无干扰的可见蓝色示踪染料可避免加样错误
