标签归档：mesg

磷酸盐检测试剂 MESG 货号：21600-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称：磷酸盐检测试剂 MESG
  • 产品货号：21600
  • 产品品牌：AAT Bioquest

简单介绍

磷酸盐检测试剂 MESG

产品描述

磷酸盐检测试剂 MESG

磷酸盐检测试剂 MESG 货号：21600

货号 21600 存储条件                    f/l
规格                         5 mg                       价格                     
Ex (nm) 330 Em (nm)
分子量 313.34 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

        磷酸盐检测试剂 MESG 是美国AAT Bioquest生产的磷酸盐检测试剂，在无机磷酸盐存在下，MESG通过嘌呤核苷磷酸化酶（EC 2.4.2.1）转化为2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤，吸收波长变为红色。该特征已用于通过分光光度法定量磷酸盐。我们提供方便的MESG的磷酸盐检测试剂盒（＃21659）。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供上等的磷酸盐检测试剂 MESG 。

产品说明书

操作步骤

1.准备分析试剂：

1.1使用前在室温下解冻所有四种成分。

1.2准备MESG底物（组分B）溶液：添加的DDH的500μL 2 O操作的小瓶MESG底物（组分B ）。通过涡旋混合均匀以获得MESG底物溶液。

注意： 250μl足以使一个平板制成单独使用的等分试样并立即储存在-20°C。

1.3准备嘌呤核苷磷酸化酶（成分C）：将100μL的DDH的添加2 O操作的小瓶嘌呤核苷磷酸化酶（PNP; 组分C ）。通过涡旋混合以获得Purine Nucleoside Phosphorylase Solution。

1.4制备测定溶液：将全部体积的MESG底物溶液（来自步骤1.2）和嘌呤核苷磷酸化酶 溶液（来自步骤1.3）加入到测定缓冲液瓶（组分A）中，充分混合以得到测定溶液。将测定溶液置于冰上。

注1：该测定溶液在冰上稳定至少4小时。

注2：为达到理想的效果，需要紫外线透明板或比色皿。

注3：由于该测定对P i 的高灵敏度，使用无P i的实验室器皿非常重要

 

2. 准备连续稀释的磷酸盐标准品和/或测试样品：

2.1制备磷酸盐标准品： 将50μL1mMKH 2 PO 4（组分D）加入950μL去离子水或酶反应缓冲液中，得到50μM磷酸盐标准溶液。

2.250μM磷酸盐标准溶液200μL1：2系列稀释，得到25，12.5，6.25，3.125，1.56和0.78μM连续稀释的磷酸盐标准。

2.3根据表1和2，将含磷酸盐的测试样品和/或磷酸盐标准品加入透明的UV透明96孔微孔板中。

表1透明的UV透明96孔板中磷酸盐标准品和测试样品的方案

BL BL TS TS …
PS1 PS1 … … …
PS2 PS2
PS3 PS3
PS4 PS4
PS5 PS5
PS6 PS6
PS7 PS7

注意：PS =磷酸盐标准，BL =空白对照，TS =测试样品。

表2每个孔的试剂组成

磷酸盐标准 空白 样本
连续稀释：50ul 不含磷酸盐的水或缓冲液：50ul 50ul

注意：将磷酸盐标准品的连续稀释液（0.1μM至50μM）加入PS1至PS7的孔中。

3.运行PhosphoWorks MESG磷酸盐测定：

3.1添加50μL/孔的测定溶液（来自S对 TEP 1.4） 中到的磷酸盐标准，空白对照和测试样品的孔中。彻底混合试剂。

注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μL分析溶液。

3.2在室温下孵育30分钟。用酶标仪或分光光度计在360nm处监测吸光度。

注意：对于需要总体积大于100μL的比色皿测定，在测量吸收之前按比例增加样品和测定试剂的体积。

比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 货号：21659-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称：比色法MESG磷酸盐检测试剂盒
  • 产品货号：21659
  • 产品品牌：AAT Bioquest

简单介绍

比色法MESG磷酸盐检测试剂盒

产品描述

PhosphoWorks 比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 *UV吸收*

货号 21659 存储条件                f/l
规格 200 Tests                            
Ex (nm)              360 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

        PhosphoWorks 比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 *UV吸收*是美国AAT Bioquest生产的用于检测ADP的试剂盒，ADP参与许多生物反应，例如蛋白激酶。 我们的ADP分析试剂盒可通过监测ADP的形成来普遍用于分析蛋白激酶反应，而ADP的形成与酶磷酸转移酶的活性成正比，并通过荧光法进行测量。 该试剂盒提供了一种快速，简单且均一的测定ADP形成或消耗的测定方法。 该测定是连续的，并且可以容易地适于自动化。 该套件很方便，需要*少的动手时间。 由于蛋白激酶与诸如癌症和其他增生性**，炎性**，代谢紊乱和神经系统**等**的广泛相关性，因此参与**开发的研究人员对蛋白激酶很感兴趣。 大多数商业化的蛋白激酶检测试剂盒都是基于对磷酸肽形成或ATP缺失的监测。 我们的ADP检测试剂盒比大多数商业激酶检测试剂盒对蛋白质激酶的检测更稳定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供上等的PhosphoWorks 比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 *UV吸收*。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.运行激酶反应（20 µL）
2.添加ADP传感器缓冲液（20 µL）
3.添加ADP传感器（10 µL）
4.在室温下孵育15分钟-1小时
5.监控荧光强度

溶液制备 

1.标准溶液

磷酸盐标准
向950μL去离子水或酶反应缓冲液中添加50μL1 mM KH2PO4（组分D），得到50μM磷酸盐标准溶液（PS7）。 取50μM磷酸盐标准溶液，并进行1：2连续稀释，以用去离子水或酶反应缓冲液连续稀释磷酸盐标准液（PS6-PS1）。

2.工作溶液

2.1将500 µL ddH2O加入小瓶MESG底物（组分B）。 涡旋混合均匀，得到MESG底物溶液。 注意：250 µl足够一块板。

2.2向小瓶嘌呤核苷磷酸化酶（PNP；组分C）中加入100 µL ddH2O。 涡旋混合均匀，得到嘌呤核苷磷酸化酶溶液。

2.3将全部体积的MESG底物溶液和嘌呤核苷磷酸化酶溶液添加到分析缓冲液（组分A）的瓶子中，并充分混合以得到工作溶液。 将工作溶液放在冰上。 注意：此工作溶液在冰上至少可稳定4小时。 不建议将工作溶液冷冻进行其他测定。 为了获得理想的结果，需要紫外线透明的板或比色皿。 由于该测定法对Pi的敏感性很高，因此使用无Pi的实验室器具极为重要。

样品示例及操作

表1.黑色96孔微孔板中ADP标准品和测试样品的布局。 SD = ADP标准（SD1-SD7，0.05至30 uM）; BL =空白对照； TS =测试样品。

BL BL TS TS
PS1 PS1 … …
PS2 PS2 … …
PS3 PS3
PS4 PS4
PS5 PS5
PS6 PS6
PS7 PS7

表2.每个孔的试剂组成。

孔 容积 试剂
PS1-PS7 50ul 连续稀释液（0.78至50 µM）
BL 50ul 不含磷酸盐的水或缓冲液
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和表2提供的布局，准备磷酸盐标准品（PS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.将50 µL工作溶液添加到磷酸盐标准液，空白对照和测试样品的每个孔中，以使总测定体积为100 µL /孔。 彻底混合试剂。 对于384孔板，请向每个孔中添加25 µL工作溶液，总体积为50 µL /孔。

3.在室温下孵育30分钟。

4.用酶标仪或分光光度计在360 nm处监测吸光度。 注意：对于需要总体积大于100 µL的比色杯分析，在测量吸收之前，应按比例将样品和分析试剂的体积相乘。