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ReadiLink 蛋白质生物素偶联试剂盒 货号：5520-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称：ReadiLink 蛋白质生物素偶联试剂盒
  • 产品货号：5520
  • 产品品牌：AAT Bioquest

简单介绍

ReadiLink 蛋白质生物素偶联试剂盒是美国AAT Bioquest生产的生物素偶联试剂盒，生物素广泛用于标记生物分子，特别是抗体。 我们的ReadiLink 蛋白质生物素化试剂盒经过优化，可用于制备用于酶**测定（EIA）的生物素标记的IgG

产品描述

ReadiLink 蛋白质生物素偶联试剂盒

ReadiLink 蛋白质生物素偶联试剂盒 货号：5520

货号                  5520                         存储条件                Multiple                       
规格 2 Labelings 价格
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

        ReadiLink 蛋白质生物素偶联试剂盒是美国AAT Bioquest生产的生物素偶联试剂盒，生物素广泛用于标记生物分子，特别是抗体。 我们的ReadiLink 蛋白质生物素化试剂盒经过优化，可用于制备用于酶**测定（EIA）的生物素标记的IgG。 它使用与IgG和其他生物分子的氨基反应的生物素琥珀酰亚胺酯。 该试剂盒配有所有必需的标记和纯化试剂。 在我们的手上，根据IgG分子上可用的分子量和赖氨酸残基，可以将3至6个生物素分子与每个IgG分子缀合。 该试剂盒可用于2种缀合反应。 对于每个缀合反应，该材料可以标记高达1mg蛋白质。 整个过程只需不到一个小时。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供*上等的ReadiLink 蛋白质生物素偶联试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

将20μl反应缓冲液（组分B）加入目标蛋白（200μl）中
将蛋白质溶液添加到ReadiLink Biotin SE（组分A）中
在室温下孵育30-60分钟
通过旋转柱纯化缀合物

工作溶液配制

蛋白质工作溶液配制方案：
为了标记1mg靶蛋白（假设目标蛋白浓度为5mg / mL），将20μL（总反应体积的10％）的反应缓冲液（组分B）与200μL目标蛋白溶液混合。注意：如果您的蛋白质浓度不同，请相应调整蛋白质体积，使~1 mg蛋白质可用于此标记反应。注意：蛋白质溶液的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用反应缓冲液（组分B）或饱和碳酸氢钠溶液将pH调节至8.0-9.0的范围。注意：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。注意：用牛血清白蛋白（BSA）或明胶稳定的不纯抗体或抗体可能效果不佳。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得*佳标记结果。注意：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显着降低。为获得*佳标记效率，建议*终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

操作步骤

1.进行结合反应

1.1将蛋白质工作溶液加入到ReadiLink 生物素SE（组分A）的小瓶中，通过反复移液几次将其充分混合，或者将小瓶涡旋几秒钟。

1.2将缀合反应混合物在室温下保持30-60分钟。注意：如果需要，可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。

2.准备旋转柱进行样品纯化

2.1将提供的旋转柱（组分C）反转几次以重新悬浮沉降的凝胶并除去任何气泡。

2.2取下**并将色谱柱放入洗涤管（2 mL，未提供）中。取下盖子，让多余的填料缓冲液通过重力排放到凝胶床的顶部。如果色谱柱没有开始流动，请将盖子推回色谱柱并再次将其取出以开始流动。丢弃排出的缓冲液，然后将色谱柱放回洗涤管中。但是，如果将色谱柱放入12 x 75 mm试管（未提供）中，请立即离心。

2.3在摇动式离心机中以1,000×g离心1分钟（参见“离心注释”部分）以除去包装缓冲液。

2.4向柱中加入1-2 mL 1X PBS（pH 7.2-7.4）。每次施用PBS后，让缓冲液通过重力排出，或将柱离心2分钟以除去缓冲液。丢弃收集管中的缓冲液。重复此过程3-4次。

2.5在摇动式离心机中以1,000×g离心2分钟（参见“离心注意事项”部分）以除去包装缓冲液。

3.纯化缀合物

3.1将色谱柱（从步骤准备旋转柱进行样品纯化）放入干净的收集管（1.5 mL，未提供）中。 小心地将样品（100-500μL，来自步骤缀合反应）直接加载到色谱柱中心。

3.2加载样品后，加入300μL1XPBS（pH 7.2-7.4），使总体积为220μL至520μL。 将柱以1,000xg离心5-6分钟，并收集含有所需生物素标记蛋白的溶液。

4.蛋白质缀合物的储存

4.1抗体缀合物应在载体蛋白（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5mg / mL储存。 当在2mM叠氮化钠存在下储存并且避光时，缀合物溶液可以在4℃下储存两个月而没有显着变化。 为了更长时间的储存，可以将蛋白质缀合物冻干或分成单次使用的等分试样并在≤-60℃下储存。

5.离心注意事项

5.1旋转柱（组分C）可以装入2mL微量离心管或12×75mm试管中，用于在离心过程中收集样品。 使用2 mL微管和色谱柱进行初始色谱柱平衡步骤。

5.2能够产生1,000 x g的*小力的摆动式离心机适用于Bio-Spin柱。 在特定转速下产生的重力是微量离心机转子半径的函数。 有关从每分钟转数（RPM）到离心力或g力的转换信息，请参阅摆动式离心机说明手册。 或者，使用以下等式计算达到1,000 x g重力所需的RPM速度。

5.3RCF（xg）=（1.12 x 10-5）×（RPM）×2×r（RCF是相对离心力，r是从转子中心到Bio-Spin柱中间测量的以厘米为单位的半径 ，RPM是转子的速度）。

数据分析

ReadiLink 蛋白质生物素偶联试剂盒 货号：5520

图1. ReadiLink 蛋白质生物素化试剂盒的化学结构

ReadiLink™AF555抗体快速标记试剂盒 货号：1276-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称：ReadiLink™AF555抗体快速标记试剂盒
  • 产品货号：1276
  • 产品品牌：AAT Bioquest

简单介绍

AF555抗体快速标记试剂盒

产品描述

ReadiLink™AF555抗体快速标记试剂盒

ReadiLink™AF555抗体快速标记试剂盒 货号：1276

货号 1276 存储条件               Multiple               
规格                       2×50 ug Labelings 价格
Ex (nm) 553 Em (nm) 568
分子量 溶剂
产品详细介绍

Readilink™蛋白标记技术是制备用于荧光成像和流式细胞仪应用的荧光抗体缀合物的*强大，*方便的工具之一。ReadiLink™AF555抗体快速标记试剂盒为制造AlexaFluor®555标记的抗体缀合物提供了*便捷的工具（AlexaFluor®是ThermoFisher Scientific的商标）。此ReadiLink™试剂盒中使用的AF555染料相当稳定，并且对蛋白质氨基具有良好的反应性和选择性。该试剂盒具有用于标记〜2×50 ug抗体的所有基本组分。试剂盒中提供的两个AF555染料小瓶中的每一个均经过优化，可标记约50 µg抗体。制备的AF555缀合物（与试剂盒一起使用）无需进一步纯化即可直接用于荧光成像和流式细胞术。它提供了制备AF555标记抗体的*便捷方法。

点击查看光谱

产品说明书

样品分析方案 

工作溶液配制

蛋白质工作溶液（溶液A）
为了标记50 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将5 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与50 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：如果蛋白质浓度不同，请相应地调整蛋白质体积，以使〜50 µg蛋白质可用于标记反应。
注意：要标记100 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将10 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与100 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：蛋白质应溶于1X磷酸盐缓冲盐水（PBS），pH 7.2-7.4；如果蛋白质溶解在甘氨酸缓冲液中，则必须使用1X PBS（pH 7.2-7.4）进行透析，或使用10 kDa的Amicon Ultra-0.5，Ultracel-10膜（密理博公司的产品目录UFC501008）去除游离的胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。
注意：抗体的纯度非常重要。
注意：为获得*佳标记效率，建议*终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL。
重要：在打开之前，将所有组分加热并短暂离心小瓶，并在开始缀合之前立即准备所需的溶液。以下方案仅供参考。

操作步骤

进行缀合反应

  1. 将蛋白质工作溶液（溶液A）添加到一个小瓶标记染料（AF555-组分A）中，并通过将小瓶涡旋几秒钟将其充分混合。
    注意：如果要标记100 µg的蛋白质，请使用两个小瓶（组分A），将100 µg的蛋白质分成2 x 50 µg的蛋白质，并使每个50 µg的蛋白质与一小瓶的标记染料反应。然后合并两个小瓶，用于下一步。
  2. 将缀合反应混合物在室温下放置30-60分钟。
    注意：如果需要，可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。 

停止缀合反应

  1. 将5 µL（对于50 µg蛋白质）或10 µL（对于100 µg蛋白质）添加到结合反应混合物中，占TQ™染色猝灭缓冲液（组分C）总反应体积的10％；混合均匀。
  2. 在室温下孵育10分钟。标记的蛋白（抗体）现在可以使用了。 

蛋白质结合物的储存
蛋白质缀合物应在载体蛋白（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5 mg / mL的浓度存储。为了更长的存储时间，可以将蛋白质结合物冻干或分成单份使用，并存储在≤–20°C下。
 
图示

ReadiLink™AF555抗体快速标记试剂盒 货号：1276

图1.分别用和不用小鼠抗微管蛋白染色的HeLa细胞，然后用ReadiLink™Rapid AF555抗体标记试剂盒（#1276）制备的Alpha Fluor™555山羊抗小鼠IgG缀合物的**荧光分析。

ReadiLink AF488抗体快速标记试剂盒 货号：1275-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称：ReadiLink AF488抗体快速标记试剂盒
  • 产品货号：1275
  • 产品品牌：AAT Bioquest

简单介绍

AF488抗体快速标记试剂盒

产品描述

ReadiLink™AF488抗体快速标记试剂盒

ReadiLink AF488抗体快速标记试剂盒 货号：1275

货号 1275                                        存储条件                   Multiple                 
规格                          2×50 ug Labelings 价格
Ex (nm) 499 Em (nm) 520
分子量 溶剂
产品详细介绍

Readilink™蛋白标记技术是制备用于荧光成像和流式细胞仪应用的荧光抗体缀合物的*强大，*方便的工具之一。ReadiLink™AF488抗体快速标记试剂盒为制造AlexaFluor®488标记的抗体缀合物提供了*便捷的工具（AlexaFluor®是ThermoFisher Scientific的商标）。此ReadiLink™试剂盒中使用的AF488染料相当稳定，并且对蛋白质氨基具有良好的反应性和选择性。该试剂盒具有用于标记〜2×50 ug抗体的所有基本组分。试剂盒中提供的两个AF488染料小瓶中的每一个均经过优化，可标记约50 µg抗体。制备的AF488缀合物（与试剂盒一起使用）无需进一步纯化即可直接用于荧光成像和流式细胞术。它提供了制备AF488标记抗体的*便捷方法。

点击查看光谱

产品说明书

样品分析方案 

工作溶液配制

蛋白质工作溶液（溶液A）
为了标记50 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将5 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与50 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：如果蛋白质浓度不同，请相应地调整蛋白质体积，以使〜50 µg蛋白质可用于标记反应。
注意：要标记100 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将10 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与100 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：蛋白质应溶于1X磷酸盐缓冲盐水（PBS），pH 7.2-7.4；如果蛋白质溶解在甘氨酸缓冲液中，则必须使用1X PBS（pH 7.2-7.4）进行透析，或使用10 kDa的Amicon Ultra-0.5，Ultracel-10膜（密理博公司的产品目录UFC501008）去除游离的胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。
注意：抗体的纯度非常重要。
注意：为获得*佳标记效率，建议*终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL。
重要：在打开之前，将所有组分加热并短暂离心小瓶，并在开始缀合之前立即准备所需的溶液。以下方案仅供参考。

操作步骤

进行缀合反应

  1. 将蛋白质工作溶液（溶液A）添加到一个小瓶标记染料（AF488-组分A）中，并通过将小瓶涡旋几秒钟将其充分混合。
    注意：如果要标记100 µg的蛋白质，请使用两个小瓶（组分A），将100 µg的蛋白质分成2 x 50 µg的蛋白质，并使每个50 µg的蛋白质与一小瓶的标记染料反应。然后合并两个小瓶，用于下一步。
  2. 将缀合反应混合物在室温下放置30-60分钟。
    注意：如果需要，可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。 

停止缀合反应

  1. 将5 µL（对于50 µg蛋白质）或10 µL（对于100 µg蛋白质）添加到结合反应混合物中，占TQ™染色猝灭缓冲液（组分C）总反应体积的10％；混合均匀。
  2. 在室温下孵育10分钟。标记的蛋白（抗体）现在可以使用了。 

蛋白质结合物的储存
蛋白质缀合物应在载体蛋白（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5 mg / mL的浓度存储。为了更长的存储时间，可以将蛋白质结合物冻干或分成单份使用，并存储在≤–20°C下。
 
图示

ReadiLink AF488抗体快速标记试剂盒 货号：1275

图1.分别用和不用小鼠抗微管蛋白染色的HeLa细胞，然后用ReadiLink™Rapid AF488抗体标记试剂盒（Cat＃1275）制备的Alpha Fluor™488山羊抗小鼠IgG结合物的**荧光分析。