ReadiLink FITC抗体标记试剂盒 货号:1299-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称:ReadiLink FITC抗体标记试剂盒
  • 产品货号:1299
  • 产品品牌:AAT Bioquest

简单介绍

金畔生物优异你看的见: (一)、AAT Bioquest中国**战略合作伙伴金畔生物——生物光谱技术的***,每周都有发货补充,货期短到您意想不到,满足客户的需求就是我们的宗旨,只要您下单,我们就能保证您在短期内收到所需产品。 (二)、新一代荧光染料分子与目标分子严格定量,光信号稳定,能非常准确地反映目标分子的真实情况。

产品描述

   简要概述

ReadiLink FITC 抗体标记试剂盒提供了一种以微观方式标记抗体的*便捷方法。该试剂盒仅需要两个简单的混合步骤而无需纯化步骤。 试剂盒中使用的iFluor 和mFluor 染料的琥珀酰亚胺酯(SE)显示出与蛋白质的脂族胺的良好反应性和选择性,并形成羧酰胺键,其与天然肽键相同且稳定。 iFluor 和mFluor-抗体缀合物可用于**荧光染色,荧光原位杂交,流式细胞术和其他生物学应用。 每个ReadiLink 抗体标记试剂盒都提供了进行两次偶联反应(2×50μg蛋白质)的所有必需成分。 每个试剂盒可用于标记50-100μg单克隆,多克隆抗体或其他蛋白质(> 10 kDa),只需两个简单的混合步骤。ReadiLink FITC 抗体标记试剂盒是美国AAT Bioquest研发的产品。

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产品说明书

标准操作规程(标记50μg蛋白质)

将所有组分加热并在打开前将样品瓶短暂离心,并在开始结合前立即准备所需的溶液。 以下SOP是标记抗HDAC IgG抗体的实例。

 

1.准备蛋白质溶液(溶液A):

为了标记50g蛋白质(假设目标蛋白质浓度为1mg / mL),将5L(总反应体积的10%)的反应缓冲液(组分B)与50L目标蛋白质溶液混合。

注1.如果您的蛋白质浓度不同,请相应调整蛋白质体积,使~50μg蛋白质可用于标记反应。

注2:为了标记100g蛋白质(假设目标蛋白质浓度为1mg / mL),将10μL(总反应体积的10%)反应缓冲液(组分B)与100μL目标蛋白质溶液混合。

注3:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中;如果蛋白质溶解在甘氨酸缓冲液中,必须用1X PBS(pH 7.2-7.4)透析,或使用Amicon Ultra-0.5,Ultracel-10膜,10 kDa(来自Millipore的cat#UFC501008)去除广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(如硫酸铵和乙酸铵)。

注4:不纯抗体、牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的抗体不会被很好地标记。

注5:如果蛋白质浓度小于1 mg / mL,则结合效率显着降低。为获得*佳标记效率,建议*终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL。

 

2.运行结合反应:

2.1将蛋白质溶液(溶液A)加入一瓶标记染料(组分A)中,通过反复移液几次将其混合均匀,或将小瓶涡旋几秒钟。

注意:使用标记染料的两个小瓶(组分A)通过将100μg蛋白质分成2×50μg蛋白质并使每个50μg蛋白质与一小瓶标记染料反应来标记100μg蛋白质。 将两个小瓶合并用于下一步。

2.2将缀合反应混合物在室温下保持30-60分钟。

注意:如果需要,可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。

 

3.停止共轭反应:

3.1添加5 L(对于50μg蛋白质)或10L(对于100μg蛋白质),其为TQ染色猝灭缓冲液(组分C)的总反应体积的10%到缀合反应混合物中(来自步骤2.2),将它们混合 好。

3.2在室温下孵育10分钟。

3.3标记的蛋白质(抗体)现在可以使用了。

 

ReadiLink 蛋白偶联终止液 货号:5400-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称:ReadiLink 蛋白偶联终止液
  • 产品货号:5400
  • 产品品牌:AAT Bioquest

简单介绍

ReadiLink 蛋白质缀合终止缓冲液用于阻止使用琥珀酰亚胺酯,磺酰氯或异硫氰酸酯的蛋白质缀合反应。它可以直接使用而无需稀释。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供*上等的ReadiLink 蛋白偶联终止液。

产品描述

ReadiLink 蛋白偶联终止液

ReadiLink 蛋白偶联终止液  货号:5400

货号                      5400 存储条件 r
规格 1 ml                  价格                     
Ex (nm) Em (nm)                
分子量 溶剂
产品详细介绍

      ReadiLink 蛋白质缀合终止缓冲液用于阻止使用琥珀酰亚胺酯,磺酰氯或异硫氰酸酯的蛋白质缀合反应。它可以直接使用而无需稀释。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供*上等的ReadiLink 蛋白偶联终止液。

产品说明书

样品实验方案

1.根据需要准备蛋白质(抗体)结合反应。

2.通过以1:50的比例添加ReadiLink 蛋白质缀合终止缓冲液来停止缀合反应(例如对于100μL缀合反应,添加2μLReadiLink 蛋白质缀合终止缓冲液)。

3.在室温下孵育10分钟。

4.标记的蛋白质(抗体)现在可以使用了。注意:如果在1个月内使用缀合物,则在用ReadiLink 蛋白质缀合终止缓冲液停止缀合反应后,不必用柱纯化缀合的蛋白质(抗体)。注意:对于长期储存,建议使用脱盐柱纯化共轭蛋白(抗体)。并且蛋白质缀合物应在载体蛋白(例如,0.1%牛血清白蛋白)存在下以> 0.5mg / mL储存。为了更长时间的储存,可以将蛋白质缀合物冻干或分成单次使用的等分试样并在≤-20℃下储存。

 

ReadiLink™AF750抗体快速标记试剂盒 货号:1279-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称:ReadiLink™AF750抗体快速标记试剂盒
  • 产品货号:1279
  • 产品品牌:AAT Bioquest

简单介绍

AF750抗体快速标记试剂盒

产品描述

ReadiLink™AF750抗体快速标记试剂盒

ReadiLink™AF750抗体快速标记试剂盒   货号:1279

货号 1279 存储条件                   Multiple             
规格                       2×50 ug Labelings 价格
Ex (nm) 752 Em (nm) 776
分子量 溶剂
产品详细介绍

Readilink™蛋白标记技术是制备用于荧光成像和流式细胞仪应用的荧光抗体缀合物的*强大,*方便的工具之一。ReadiLink™AF750抗体快速标记试剂盒为制造AlexaFluor®750标记的抗体缀合物提供了*便捷的工具(AlexaFluor®是ThermoFisher Scientific的商标)。此ReadiLink™试剂盒中使用的AF750染料相当稳定,并且对蛋白质氨基具有良好的反应性和选择性。该试剂盒具有用于标记〜2×50 ug抗体的所有基本组分。试剂盒中提供的两个AF750染料小瓶中的每一个均经过优化,可标记约50 µg抗体。制备的AF750缀合物(与试剂盒一起使用)无需进一步纯化即可直接用于荧光成像和流式细胞术。它提供了制备AF750标记抗体的*便捷方法。

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产品说明书

样品分析方案 

工作溶液配制

蛋白质工作溶液(溶液A)
为了标记50 µg蛋白质(假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL),请将5 µL(反应总体积的10%)反应缓冲液(组分B)与50 µL目标蛋白质溶液混合。
注意:如果蛋白质浓度不同,请相应地调整蛋白质体积,以使〜50 µg蛋白质可用于标记反应。
注意:要标记100 µg蛋白质(假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL),请将10 µL(反应总体积的10%)反应缓冲液(组分B)与100 µL目标蛋白质溶液混合。
注意:蛋白质应溶于1X磷酸盐缓冲盐水(PBS),pH 7.2-7.4;如果蛋白质溶解在甘氨酸缓冲液中,则必须使用1X PBS(pH 7.2-7.4)进行透析,或使用10 kDa的Amicon Ultra-0.5,Ultracel-10膜(密理博公司的产品目录UFC501008)去除游离的胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。
注意:抗体的纯度非常重要。
注意:为获得*佳标记效率,建议*终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL。
重要:在打开之前,将所有组分加热并短暂离心小瓶,并在开始缀合之前立即准备所需的溶液。以下方案仅供参考。

操作步骤

进行缀合反应

  1. 将蛋白质工作溶液(溶液A)添加到一个小瓶标记染料(AF750-组分A)中,并通过将小瓶涡旋几秒钟将其充分混合。
    注意:如果要标记100 µg的蛋白质,请使用两个小瓶(组分A),将100 µg的蛋白质分成2 x 50 µg的蛋白质,并使每个50 µg的蛋白质与一小瓶的标记染料反应。然后合并两个小瓶,用于下一步。
  2. 将缀合反应混合物在室温下放置30-60分钟。
    注意:如果需要,可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。 

停止缀合反应

  1. 将5 µL(对于50 µg蛋白质)或10 µL(对于100 µg蛋白质)添加到结合反应混合物中,占TQ™染色猝灭缓冲液(组分C)总反应体积的10%;混合均匀。
  2. 在室温下孵育10分钟。标记的蛋白(抗体)现在可以使用了。 

蛋白质结合物的储存
蛋白质缀合物应在载体蛋白(例如0.1%牛血清白蛋白)存在下以> 0.5 mg / mL的浓度存储。为了更长的存储时间,可以将蛋白质结合物冻干或分成单份使用,并存储在≤–20°C下。
 
图示

ReadiLink™AF750抗体快速标记试剂盒   货号:1279

图1.HeLa细胞的**荧光分析,先用ReadiLink™快速AF750抗体标记试剂盒(#1279)制备,然后用或不用小鼠抗微管蛋白染色,然后用Alpha Fluor™750山羊抗小鼠IgG缀合物染色。