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超敏探针RT-PCR试剂盒

发表于由

上海金畔生物科技代理销售超敏探针RT-PCR试剂盒，欢迎访问官网了解更多产品信息。

用于快速的cDNA合成和高度可重复性的两步法RT-PCR

  • gDNA Removal Mix可消除gDNA带来的误差
  • 内质控可指示cDNA合成的质量
  • 高亲和性逆转录酶可实现宽线性范围的cDNA合成

独特的QuantiNova Reverse Transcription Kit提供了含有基因组DNA去除方案和内质控的一种快速便捷的cDNA合成方法。gDNA Removal Mix可有效去除RNA样本中的基因组DNA污染，同时内质控RNA可以监测逆转录和扩增反应是否成功。QuantiNova Reverse Transcription Kit提供了快速高效逆转录反应所需的一切。合成的cDNA适用于进行real-time PCR, 可以对任何mRNA区域的靶向序列进行可靠定量。
 

Performance
独特的gDNA Removal Mix可迅速有效去除RNA样本中的基因组DNA污染。去除基因组DNA污染对于获得精确基因表达结果非常关键，并且在不能设计出RNA特异性的引物时，例如当分析单外显子基因时，也需要去除基因组DNA污染。使用gDNA Removal Buffer可以节省时间和成本，因为不需要在反应中或反应后单独进行DNase消化。 

全新开发的内质控是一种成分明确的转录本（RNA分子），可直接加入您的样本并同时被逆转录为cDNA，可直接反应仪器或相应试剂是否正常，实验构建的体系是否存在错误，以及反应体系中是否存在抑制剂。预期的Cq (CT)范围可以用来确认逆转录和PCR扩增的成功与否，以及实验结果的可重复性。 

QuantiNova Reverse Transcriptase的高RNA亲和性确保您可从任何RNA模板获得高产率cDNA。即便是难扩增模板，如高GC含量或含有复杂二级结构的模板，也可被成功进行逆转录反应。Reverse Transcription Mix包含一种特别优化的oligo-dT和随机引物混合物，可以从包括5’区域在内的RNA转录本的任何位置进行cDNA合成。无论扩增靶标位于转录本的哪个位置，该试剂盒均能提供可供real-time PCR分析使用的高产量cDNA。同时对于低表达丰度的基因, 该试剂盒还可提供更高灵敏度的检测能力。 

QuantiNova Reverse Transcription Kit可在较宽的起始量范围内提供精确的结果，在标准的实验方案中起始RNA量可最高达5 µg，在特殊要求的实验条件下该用量可以加倍。 

Principle
QuantiNova Reverse Transcriptase具有高RNA亲和性，可以在极宽的模板量范围内（10 pg– 5 μg）合成cDNA（见图：5 µg–10 pg起始 RNA的精确定量）。无论扩增靶标位于转录本的哪个位置，该试剂盒可提供用于real-time PCR分析的高产量cDNA。即使难扩增模板，比如高GC含量或含有复杂二级结构的模板，也可被成功进行逆转录反应。QuantiNova RT Buffer经过优化，可兼容real-time PCR缓冲液。

为获得精确的real-time RT-PCR基因表达检测结果，非常重要的一点是保证只有cDNA被扩增和检测到。gDNA Removal Mix可迅速有效的去除基因组DNA干扰(见图：有效去除gDNA污染保证准确定量转录本）。使用gDNA Removal Mix节省了时间和成本，因为不需要在反应中或反应后单独进行DNase消化。同时，也无需设计RNA特异性引物或探针。

检测cDNA合成的差异度可以显示实验结果的可重复性。全新开发的内质控是一种成分明确的转录本（RNA分子），可直接加入您的样本并同时被逆转录为cDNA，可直接反应仪器或相应试剂是否正常，实验构建的体系是否存在错误，以及反应体系中是否存在抑制剂。因为内质控和真实转录本的性质相似，所以它可以在接下来的qPCR实验中用来确认逆转录和PCR扩增的成功与否（见图：内质控可靠检测是否存在抑制剂）。
 

QuantiNova Reverse Transcription Kit成分
成分 优势
gDNA Removal Mix 确保在real-time RT-PCR中只检测RNA
Internal Control RNA 确认RT-PCR成功与否
QuantiNova Reverse Transcriptase RNA模板量范围极宽（10 pg – 5 μg RNA）
高灵敏度
QuantiNova RT buffer system 逆转录难扩增模板
RT Primer Mix 从转录本任意区域合成cDNA，包括从5’区
 

Procedure
使用QuantiNova Reverse Transcription Kit进行基因组DNA去除和cDNA合成仅需20分钟。该试剂盒包含进行快速cDNA合成的所需的一切成分。

纯化后的RNA和gDNA Removal Mix简单孵育即可除去基因组DNA污染。和其它方法不同的是，RNA样本接下来可直接与Reverse Transcription Mix和Reverse Transcription Enzyme的预混液混合，进行逆转录反应。使用QuantiNova Reverse Transcriptase，逆转录反应可以在低温下进行，包括对于复杂的二级结构模板。反应在42°C的温度条件下进行保证了RNA的完整性，并随后在85°C进行酶灭活以终止反应。不需要进行额外的RNA变性或RNase H降解。

​

Applications
QuantiNova Reverse Transcription Kit可从任何起始材料（包括激光微切割样本或组织活检样本）获得高效及高灵敏度real-time RT-PCR结果。

相关产品      
商品编号 商品品名 规格 品牌
208352 超敏探针RT-PCR试剂盒 100T Qiagen
208356 超敏探针RT-PCR试剂盒 2500T Qiagen
208354 超敏探针RT-PCR试剂盒 500T Qiagen

 

Performance
独特的gDNA Removal Mix可迅速有效去除RNA样本中的基因组DNA污染。去除基因组DNA污染对于获得精确基因表达结果非常关键，并且在不能设计出RNA特异性的引物时，例如当分析单外显子基因时，也需要去除基因组DNA污染。使用gDNA Removal Buffer可以节省时间和成本，因为不需要在反应中或反应后单独进行DNase消化。 

全新开发的内质控是一种成分明确的转录本（RNA分子），可直接加入您的样本并同时被逆转录为cDNA，可直接反应仪器或相应试剂是否正常，实验构建的体系是否存在错误，以及反应体系中是否存在抑制剂。预期的Cq (CT)范围可以用来确认逆转录和PCR扩增的成功与否，以及实验结果的可重复性。 

QuantiNova Reverse Transcriptase的高RNA亲和性确保您可从任何RNA模板获得高产率cDNA。即便是难扩增模板，如高GC含量或含有复杂二级结构的模板，也可被成功进行逆转录反应。Reverse Transcription Mix包含一种特别优化的oligo-dT和随机引物混合物，可以从包括5’区域在内的RNA转录本的任何位置进行cDNA合成。无论扩增靶标位于转录本的哪个位置，该试剂盒均能提供可供real-time PCR分析使用的高产量cDNA。同时对于低表达丰度的基因, 该试剂盒还可提供更高灵敏度的检测能力。 

QuantiNova Reverse Transcription Kit可在较宽的起始量范围内提供精确的结果，在标准的实验方案中起始RNA量可最高达5 µg，在特殊要求的实验条件下该用量可以加倍。 

Principle
QuantiNova Reverse Transcriptase具有高RNA亲和性，可以在极宽的模板量范围内（10 pg– 5 μg）合成cDNA（见图：5 µg–10 pg起始 RNA的精确定量）。无论扩增靶标位于转录本的哪个位置，该试剂盒可提供用于real-time PCR分析的高产量cDNA。即使难扩增模板，比如高GC含量或含有复杂二级结构的模板，也可被成功进行逆转录反应。QuantiNova RT Buffer经过优化，可兼容real-time PCR缓冲液。

为获得精确的real-time RT-PCR基因表达检测结果，非常重要的一点是保证只有cDNA被扩增和检测到。gDNA Removal Mix可迅速有效的去除基因组DNA干扰(见图：有效去除gDNA污染保证准确定量转录本）。使用gDNA Removal Mix节省了时间和成本，因为不需要在反应中或反应后单独进行DNase消化。同时，也无需设计RNA特异性引物或探针。

检测cDNA合成的差异度可以显示实验结果的可重复性。全新开发的内质控是一种成分明确的转录本（RNA分子），可直接加入您的样本并同时被逆转录为cDNA，可直接反应仪器或相应试剂是否正常，实验构建的体系是否存在错误，以及反应体系中是否存在抑制剂。因为内质控和真实转录本的性质相似，所以它可以在接下来的qPCR实验中用来确认逆转录和PCR扩增的成功与否（见图：内质控可靠检测是否存在抑制剂）。
 

QuantiNova Reverse Transcription Kit成分
成分 优势
gDNA Removal Mix 确保在real-time RT-PCR中只检测RNA
Internal Control RNA 确认RT-PCR成功与否
QuantiNova Reverse Transcriptase RNA模板量范围极宽（10 pg – 5 μg RNA）
高灵敏度
QuantiNova RT buffer system 逆转录难扩增模板
RT Primer Mix 从转录本任意区域合成cDNA，包括从5’区
 

Procedure
使用QuantiNova Reverse Transcription Kit进行基因组DNA去除和cDNA合成仅需20分钟。该试剂盒包含进行快速cDNA合成的所需的一切成分。

纯化后的RNA和gDNA Removal Mix简单孵育即可除去基因组DNA污染。和其它方法不同的是，RNA样本接下来可直接与Reverse Transcription Mix和Reverse Transcription Enzyme的预混液混合，进行逆转录反应。使用QuantiNova Reverse Transcriptase，逆转录反应可以在低温下进行，包括对于复杂的二级结构模板。反应在42°C的温度条件下进行保证了RNA的完整性，并随后在85°C进行酶灭活以终止反应。不需要进行额外的RNA变性或RNase H降解。

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Applications
QuantiNova Reverse Transcription Kit可从任何起始材料（包括激光微切割样本或组织活检样本）获得高效及高灵敏度real-time RT-PCR结果。

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商品编号 商品品名 规格 品牌
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超敏探针PCR试剂盒

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用于基于探针技术的real-time PCR，具有高度灵敏、特异性、超快速的特性

  • 准确检测少量靶基因，甚至可检测1个拷贝的靶基因
  • 每次反应可检测多个靶基因
  • 在30°C下可保持稳定达100小时，适用于多种灵活的工作流程
  • 便利的观察移液，减少移液失误
  • 具有高度特异性，可获得更出色结果
  • 超快速的反应时间可实现更高处理通量

QuantiNova Probe PCR Kit可避免在较低温度时反应出现错配。该试剂盒采用抗体介导的新型热启动技术，提高了基于探针的real-time PCR反应的特异性和反应效率，可在多种real-time PCR仪上对cDNA或gDNA进行单重或双重分析，获得准确结果。该试剂盒的反应液可在室温下保持稳定长达100小时，无需加入冷却剂；因此是处理高通量样本和自动化工作流程的理想选择。试剂盒自带移液追踪体系，便于观察移液是否正确，让您无后顾之忧。其具有高度灵敏性，能够检测少量的靶基因，确保每次qPCR都获得可靠的反应结果。
 

Performance
带有惰性染料，便于观察移液

QuantiNova Probe PCR Kit中的预混液含有蓝色惰性染料，不会干扰real-time PCR，但是使反应液在管中或孔板中便于观察。QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer含有黄色惰性染料。当稀释在QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer中的模板核酸被加入预混液时，溶液颜色由蓝色变为绿色（参见”Built-in pipetting control”），便于观察移液和反应体系构建是否正确。 
 

反应液可稳定储存达100小时

real-time PCR混合液可在30°C储存长达100小时，不会影响后续反应表现（表1）。凭借其出色的稳定性，即使长时间在室温储存，也无需加入冷却剂，QuantiNova Probe PCR Kit是高通量反应的理想选择（参见下表）。
 

表1. 反应液的储存时间对反应稳定性的影响
 
                                                                                 平均CT值
   QuantiNova Probe PCR Kit 来自供应商L的Probe PCR kit
模板量，单位ng  0 h  100 h  0 h   100 h
 10  25.09  25.26  24.14  27.08
 1  28.51  28.66  27.50  30.51
 0.1  31.94  31.78  31.01  34.08
 无模板对照  无检测结果  无检测结果  无检测结果  无检测结果
表1.  对反应液放置于30°C 100小时之前和之后的CT值对比。Real-time PCR反应液包括预混液、cDNA模板、引物和探针，在30°C孵育100小时后，之后与刚制备的反应液同时进行real-time PCR反应。对三种不同模板量进行三次重复实验。对比试剂盒来自供应商L的基于探针技术的PCR试剂盒，QuantiNova Probe PCR Kit的CT值在反应液于30°C放置较长时间后没有变化。
准确、灵敏的检测单一DNA分子

QuantiNova Probe PCR Kit具有高度灵敏性，能够准确、灵敏的检测即使是一个拷贝（参见”Sensitive and robust detection of a single target copy”）。该试剂盒提供的特制预混液能够在单管中检测两种丰度差异极大的靶基因。因此可节约时间、费用、以及所需样本量。此外，获得的双重PCR分析数据与单重PCR分析的数据相当（参见”Comparable results in duplex and singleplex PCR”）。
 

对困难基因也能有出色表现

QIAGEN成熟的专有缓冲液技术与新型QuantiNova DNA Polymerase、QuantiNova Antibody和QuantiNova Guard配合起来，确保了real-time PCR实验的成功，无需进行费时、费试剂的反应条件优化；即使对挑战性模板也能实现成功扩增（参见”Superior results with challenging assays”）。   
 

在多种real-time PCR仪上都有稳定表现

QuantiNova Probe PCR Kit可用于多种real-time PCR仪。试剂盒中以单管提供ROX染料，如使用需要ROX作为参比染料的PCR仪，则可加入该染料。该试剂盒在不同PCR仪上使用均可获得出色结果，具有灵敏性、可重复性和高效的特点。尽管不同的PCR仪使用不同的反应实验方案，该试剂盒都能获得稳定的结果（参见”Consistent results with various real-time PCR cyclers“）。

Principle
QuantiNova Probe PCR Kit采用新型的抗体介导的热启动技术，可对cDNA或gDNA进行单重或多重real-time PCR检测，具有高度特异性（参见”Novel antibody mediated hot-start mechanism”）在温度较低时，QuantiNova DNA Polymerase在QuantiNova Antibody和新型添加剂QuantiNova Guard的作用下，出于非活性状态。严格的热启动机制能够防止引物的非特异性接合，以及防止生成引物二聚体。将温度升至95°C，两分钟后，QuantiNova Antibody和QuantiNova Guard发生变性，QuantiNova DNA Polymerase被激活，开始PCR扩增反应。

Procedure
QuantiNova Probe PCR Kit含有即用型预混液，因此无需优化反映条件。只需将gDNA或cDNA模板、引物和探针加入预混液，按照试剂盒使用手册中的实验方案进行反应，就可快速获得可靠结果。ROX参比染料在单管中另外提供，染料浓度可依据PCR仪种类进行调节，因此QuantiNova Probe PCR Kits可用于各种real-timePCR仪。由于ROX染料浓度经过优化，因此该试剂盒可通过自动数据分析，检测低拷贝数基因。

Applications
QuantiNova Probe PCR Kit可用于基于探针的cDNA基因表达分析和定量gDNA分析，适用于多种real-time PCR仪，包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的PCR仪。
 

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商品编号 商品品名 规格 品牌
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超敏病毒DNA/RNA提取试剂盒

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上海金畔生物科技代理销售超敏病毒DNA/RNA提取试剂盒，欢迎访问官网了解更多产品信息。

从血清和血浆中浓缩和纯化病毒DNA和RNA

  • 快速纯化高品质的即用型病毒DNA和RNA
  • 无需有机抽提或乙醇沉淀
  • 重复性好，产量高
  • 完全去除污染物和抑制剂

QIAamp UltraSens Virus Kit使用创新技术浓缩血清和血浆样品中的病毒核酸，接着使用经验证的QIAamp技术纯化核酸。样本起始体积可多至1 ml，向样本中添加创新型试剂纯化得到高浓缩核酸。试剂与核酸结合成复合物，可通过低速离心高度浓缩。

Performance

QIAamp UltraSens Virus Kit适用于从多种病毒样本中纯化病毒核酸，也可高效分离血浆和血清中的胞外基因组DNA。制备的核酸品质卓越，适用于敏感的下游应用（参见”High performance in RT-PCR”）。

纯化的DNA和RNA多种下游应用，包括：

PCR和real-time PCR
传染性疾病研究

Principle

DNA特异性结合到QIAamp硅胶膜上，污染物流出。通过两步高效洗涤完全去除二价阳离子和蛋白质等PCR抑制物，再用水或试剂盒中的缓冲液洗脱结合在离心柱上的纯DNA。

QIAamp技术从无细胞体液中纯化的病毒RNA和DNA，可即时用于PCR和印迹实验中。QIAamp样本制备技术完全得到验证认可。

Procedure

核酸浓缩通过将一种新型的试剂加入样本中来实现。试剂与核酸形成复合物，通过低速离心得到高浓缩核酸。该步骤可简便地对大体积样本进行核酸纯化。接着使用QIAamp硅胶膜技术纯化病毒核酸（参见”Procedure”）。将裂解物上样到QIAamp离心柱，用洗涤缓冲液去除杂质，最后用纯水或低盐缓冲液洗脱得到高纯度的即用型DNA。

该流程无需超速离心或特殊的实验装置，在流程开始时进行内部控制，从而对纯化处理进行全程监测。

Applications

QIAamp UltraSens Virus Kit采用创新技术浓缩血浆和血清样本中的病毒核酸，并使用经验证的QIAamp技术纯化核酸。该流程可提高灵敏度，适用于病毒载量监测等要求较高病毒核酸回收率的应用。1小时内即可完成对1 ml血浆或血清样本的制备，核酸回收率为85%，洗脱体积为60 µl。
 

Features
Specifications
应用 PCR, qPCR, real-time PCR
洗脱体积 60 µl
规格 MinElute columns
主要样本类型 Serum, plasma
处理 Manual (centrifugation)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 Viral DNA, viral RNA
样本量 1 ml
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 1 hour
产量 >85% recovery

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