天恩泽 荧光及可视化RT-LAMP扩增试剂盒 200603-50，产品简介：产品品牌：天恩泽产品名称; 荧光及可视化RT-LAMP扩增试剂盒产品货号：200603-50产品规格：50次产品价格：1590元
天恩泽 荧光及可视化RT-LAMP扩增试剂盒 200603-50
我们上海金畔公司作为天恩泽公司的代理商，先简单介绍一下天恩泽公司：
北京天恩泽公司的目标是研发出技术先进、质量稳定、价格合理的试剂精品。公司的创立宗旨是技术至上、质量至上、服务至上，公司的产品研发团队均为高学历并在海外有长期的科研经验；公司的管理团队已在行业内拥有超过20年管理经验；同样，公司的运营团队也有丰富的执行经验。
北京天恩泽公司充分了解客户的需求，并努力创新以满足客户不断发展的需求。我们将与我们的客户共同成长，成为生物技术领域中zhuoyue产品和服务的jijia提供者。
DNAout、RNAout、Erasol、天净沙、克必隆、归去来、好亦多均为天恩泽基因注册商标(试剂类)。
天恩泽 荧光及可视化RT-LAMP扩增试剂盒 200603-50，产品简介：
产品品牌：天恩泽
产品名称; 荧光及可视化RT-LAMP扩增试剂盒
产品货号：200603-50
产品规格：50次
产品价格：1590元
天恩泽 荧光及可视化RT-LAMP扩增试剂盒 200603-50，产品说明：
本产品是根据本公司的双染料 RT-LAMPzhuanli技术开发的荧光和可见光双 模式RT-LAMP扩增及检测试剂盒，它既可以用于荧光RT-LAMP扩增及检测， 也可以用于可视化 RT-LAMP 扩增及检测，适用于各种针对核酸的快速定性检 测。本产品具有下列特点：
- 一般60分钟内出结果（取决于靶分子浓度），比RT-PCR快约1小时
- 20 μL的反应体系，大样品加样量达到14 μL。
3. 含可见光和荧光染料，既可以用金属浴和水浴扩增用可见光肉眼判断结果， 也可用荧光PCR仪进行实时荧光检测。
4. 内含的dUTP-UNG可防交叉污染。
5. 特异性比RT-PCR高，因为RT-LAMP 扩增使用4-6条引物而不是两条。6. 灵敏性可达10拷贝/反应以下（随引物而不同），故假阴性率更低。
7. 本产品跟北京天恩泽的多种免提取试剂盒（如免提病毒保存液）兼容。
8. 只可用于科研，只可进行定性检测，不能用于定量检测。
9. 本产品只适用于RT-LAMP 检测，不适用于进行RT-LAMP检测。
10. 本产品足够50次20 μL体系的荧光及可视化RT-LAMP 扩增。
天恩泽 荧光及可视化RT-LAMP扩增试剂盒 200603-50，产品规格及成分：
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成分 |
编号 |
5孔塑料盒包装 |
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4×荧光及可视化RT-LAMP MagicMix |
200603a |
250 μL（绿盖） |
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4×阳性对照模板-引物混合物 |
130923a |
50 μL（黄盖） |
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使用手册 |
200603sc |
1份 |
运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。
自备试剂 RT-LAMP模板及RT-LAMP 引物、PCR级石蜡油 （仅对使用金属浴或水浴者） 。
天恩泽 荧光及可视化RT-LAMP扩增试剂盒 200603-50，使用方法：
准备工作：如果使用水浴锅或金属浴，需要在实验启动前打开并调到65℃。如 果用金属浴，还必须在孔中加水以填充金属孔和反应管间的空隙。本公司发现 很多水浴锅或金属浴温度不准，故建议先用阳性对照和阴性对照测试所用仪器 在60℃、62.5℃、65℃、67.5℃和70℃五个温度下扩增效果，选择阳性和阴 性颜色差异大的温度进行扩增
一、样品RNA的制备
1. 用自选方法纯化样品 RNA，本试剂盒跟市场上大多数 RNA 提取试剂盒兼 容，可以选购本公司的各种免提取试剂盒。
2. 如果有 N 个样品，则至少需要做 N+2 个样品制备，包括一个制备阳性对 照（制备时加入自备的跟要检测的靶分子相同的阳性对照模板，一起经历提取过程）和一个制备阴性对照（用水替代样品）。后N+2个样品一起 进行RNA 提取操作，得到N+2个RNA 样品。 二、配制并测试自备的20×RT-LAMP引物混合液
3. 用超纯水将自备的6种（或4种）RT-LAMP引物干粉稀释到母液浓度（100 μM），然后按下表配制100μL的20×RT-LAMP引物混合液，此混合液 足够 100 次 20 μL 体系的 RT-LAMP 扩增。如果需要配制的 20× RT-LAMP引物混合液体积异于100 μL，则各成分的用量请按比例调整。 引物混合液可以在-20℃放置2年。
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引物名称 |
母液浓度 |
加母液量 |
在20×RT-LAMP 引物混合液中的浓度 |
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FIP引物 |
100 μM |
32 μL |
32 μM |
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BIP引物 |
100 μM |
32 μL |
32 μM |
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F3引物 |
100 μM |
4 μL |
4 μM |
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B3引物 |
100 μM |
4 μL |
4 μM |
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Loop F |
100 μM |
8 μL |
8 μM |
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Loop B |
100 μM |
8 μL |
8 μM |
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超纯水 |
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12 μL |
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注意：总体积为100 μL。如果自备的RT-LAMP引物不含Loop引物，则按 上表配制时Loop用超纯水替代，使得总体积为100 μL。
4. 测试引物的非特异扩增：在加模板和不加模板（至少1000拷贝/反应）的 RT-LAMP 系统中测试引物效果，引物选择标准可以自己掌握，keyi选择 无模板反应的Ct值比有模板反应的Ct值大60以上（每个循环1 分钟） 的引物对。根据结果设定判断阴性和阳性结果的阈值（本产品只用于定性）。 如果没有 qPCR仪器，只能用肉眼检测，则无需设定阈值，届时靠跟阳性 对照和阴性对照管的颜色来判断。
三、RT-LAMP扩增（20 μL体系）
5. 反应设置：如果有N+2个RNA纯化样品，则keyi设置N+5个RT-LAMP 扩增，增加扩增阳性对照、无模板对照和无引物对照各 1 个。在 N+5 个 0.2mL的PCR管中加入下列成分：
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成分 |
N+2个 样品管 |
无模板 对照管 |
无引物 对照管 |
扩增阳性 对照管 |
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4×荧光及可视化 RT-LAMP MagicMix |
各5 μL |
5 μL |
5 μL |
5 μL |
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自备20×引物混合液 |
各1 μL |
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1 μL |
– |
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自备N+2 个 样品RNA |
多14 μL |
同样品管 |
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– |
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4×阳性对照 模板-引物混合物 |
– |
– |
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5 μL |
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超纯水 |
补到20μL |
补到20μL |
14 μL |
10 μL |
6. 混匀后进行扩增，可以根据实验室条件选择下列两种方式进行扩增和检测。
7. 如使用金属浴、水浴或普通无热盖 PCR 仪，则每管加 30μL 石蜡油，再 65℃保温120分钟。如不加石蜡油，保温期间水分蒸发，会有非特异扩增。
8. 如果使用荧光定量 PCR 仪：聚合温度设为 65℃，1 次循环 1 分钟，120 个循环，每分钟在FAM通道采集一次荧光信号。
三、结果分析及解读
9. 阈值设定：在*分钟荧光值会升高再稳定，故只能取第10到15分钟 的荧光值作阈值。此现象估计是常温下可见光染料和荧光染料结合并对后 者有淬灭作用，加热到65℃后两种染料分开，淬灭逐渐解除，荧光逐渐升 高，10分钟后稳定。没加可见光染料的反应无此现象。
10. 所有阳性对照有阳性结果（Ct在阈值以内或反应液呈蓝色），所有阴性对 照有阴性结果（Ct大于阈值或反应液呈淡蓝色），否则提取实验或扩增实 验无效。需要寻找原因或跟厂家联系，暂时不需要分析样品的结果。
11. 如果阳性和阴性对照结果正常，则实验有效，可以分析样品的情况。如果 肉眼观察，样品管的颜色接近扩增阳性对照管则说明有扩增有靶分子，如 果接近无模板和无引物的阴性对照，则说明无扩增无靶分子。反应结果示 例如下（9为阴性，10为阳性）：
12. 如果是用荧光PCR仪，样品Ct将小于阈值则为阳性，大于阈值则为阴性。
13. 当实时荧光检测和可视化检测同时使用时，如果不一致，以实时荧光 RT-LAMP的数据为准。一般可视化结果滞后实时荧光检测结果20-30分 钟，也就是说，在 qPCR 仪上第 30 分钟时呈现阳性的样品，其颜色变化 在第50-60分钟时才能观察到。
关联产品 免核酸纯化病毒保存液，PCR级石蜡油
以下是天恩泽品牌部分热销产品，如需其他品牌产品请咨询本店客服：
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品牌 |
产品货号 |
货品名称 |
规格 |
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天恩泽 |
200101-50 |
第二代病毒采运试剂盒（低敏型）原拭子病毒采运试剂盒，核酸诊断用 |
50次/盒 |
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天恩泽 |
200201-50 |
第三代免提核酸提取病毒采运试剂盒 |
50次/盒 |
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天恩泽 |
200601-50 |
荧光及可视化LAMP试剂盒 |
50次/盒 |
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天恩泽 |
200603-50 |
荧光及可视化RT-LAMP试剂盒 |
50次/盒 |
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天恩泽 |
200108-2.5L |
xinguan病毒灭活液A型 |
2.5L/瓶 |
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天恩泽 |
91103-250 |
非冻型拭子病毒保存液 |
250ml/瓶 |
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天恩泽 |
15-81920 |
SARS-CoV-2冠状病毒N基因探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
50次/盒 |
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天恩泽 |
16-81920 |
SARS-CoV-2冠状病毒N基因荧光及可视化RT-LAMP试剂盒 |
50次/盒 |
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天恩泽 |
15-23000 |
African Swine Fever Virus(ASFV)非洲猪瘟病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 |
50次/盒 |
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天恩泽 |
16-23000 |
African Swine Fever Virus(ASFV)非洲猪瘟病毒LAMP试剂盒 |
50次/盒 |
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天恩泽 |
15-29420 |
Yersinia pestis鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)探针法荧光定量PCR试剂盒 |
50次/盒 |
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天恩泽 |
71201-50 |
柱式动物RNA提取试剂盒 |
50次/套 |
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天恩泽 |
71001-50 |
柱式病毒RNA提取试剂盒 |
50次/套 |
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天恩泽 |
60705-50 |
一管式植物DNA提取试剂盒 |
50次/套 |
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天恩泽 |
3070-100 |
动物RNA提取试剂盒（TRIzol） |
100mL/瓶 |
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天恩泽 |
81027-50 |
TRIzol伴侣 |
50次/套 |
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天恩泽 |
70701-50 |
柱式病毒DNA提取试剂盒 |
50次/套 |
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天恩泽 |
3674-50 |
一管式病毒DNA提取试剂盒 |
50次/套 |
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天恩泽 |
90404-50 |
柱式植物RNA提取试剂盒2.0 |
50次/套 |
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天恩泽 |
60802-50 |
柱式细菌DNA提取试剂盒 |
50次/盒 |
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天恩泽 |
71203-50 |
柱式植物RNA提取试剂盒 |
50次/套 |
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天恩泽 |
60602-50 |
柱式植物DNA提取试剂盒 |
50次/套 |
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天恩泽 |
90315-250 |
非冻型尿液DNA保存液 |
250mL/瓶 |
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天恩泽 |
3660-250 |
非冻型组织DNA保存液 |
250mL/瓶 |
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天恩泽 |
3060-250 |
非冻型组织RNA保存液 |
250m/瓶 |
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天恩泽 |
90805-10 |
即用型PCR试剂盒3.0 |
1ml×10/盒 |
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天恩泽 |
90708-1.5 |
即用型高保真PCR试剂盒 |
1.5mL/瓶 |
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天恩泽 |
90408-1 |
2X 染料法荧光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix） |
1ml/管 |
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天恩泽 |
190303-1 |
2X 探针法qPCR Mix （TaqMan探针法荧光定量PCR试剂盒） |
1ml/管 |
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天恩泽 |
101005-100 |
即用型易错PCR试剂盒 |
100次/套 |
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天恩泽 |
160903-100 |
可调式易错PCR试剂盒 |
100次/套 |
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天恩泽 |
3090-250 |
天净沙RNase清除剂A型（原固相RNase清除剂） |
250mL/瓶 |
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天恩泽 |
3091-1.5 |
天净沙RNase清除剂B型（原液相RNase清除剂） |
1.5mL/套 |
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天恩泽 |
140648-250 |
PCR污染清除剂 |
250 mL/瓶 |
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天恩泽 |
70902-1.5 |
PCR级甜菜碱溶液，5M |
1.5mL/管 |
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天恩泽 |
100805B-250 |
Tris饱和酚-lvfang-yiwuchun混合液（DNA提取用） |
250ml/瓶 |
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天恩泽 |
130502-50 |
无内毒素水 |
50mL/瓶 |
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天恩泽 |
160251-250 |
4%中性甲醛固定液 |
250mL/瓶 |
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天恩泽 |
100302-100 |
包涵体蛋白溶解及复性套装 |
100次/次 |
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天恩泽 |
200604 |
核酸释放剂(DNA-RNA通用型) |
300次/盒 |
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天恩泽 |
61202-10 |
天净沙核酸释放剂 |
10mL/瓶 |
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天恩泽 |
70303-1.5 |
绿如蓝核酸染料（UV） |
1.5mL/管 |
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天恩泽 |
70503 |
DNA电泳分子量标准系列 |
50次/管 |
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天恩泽 |
小师弟 |
高压快速电泳预制胶 |
10块/盒 |