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吲哚菁绿ICG Xtra-Osu 货号：186-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称：吲哚菁绿ICG Xtra-Osu
  • 产品货号：186
  • 产品品牌：AAT Bioquest

简单介绍

吲哚菁绿ICG Xtra-Osu

产品描述

吲哚菁绿ICG Xtra-Osu

吲哚菁绿ICG Xtra-Osu 货号：186

货号 186 存储条件 f/l
规格 1 mg
Ex (nm) 790 Em (nm) 815
分子量 1232.62 溶剂 DMSO
产品详细介绍

吲哚菁绿ICG Xtra-Osu是美国AAT Bioquest生产的Cy系列染料，吲哚菁绿（ICG）是一种用于医学诊断的花青染料。它用于确定心输出量，肝功能和肝血流量，以及用于眼科血管造影。它具有接近800nm的峰值光谱吸收。这些红外线能穿透视网膜层，使ICG血管造影成像比荧光血管造影更深的循环模式。ICG的半衰期为150至180秒，仅通过肝脏从胆汁液中排出。*近的一项研究表明ICG在注射后20分钟内靶向动脉粥样硬化，并提供足够的信号增强，用于动脉粥样硬化兔子体内的脂质，发炎，冠状动脉大小的斑块的检测。离体荧光反射成像显示，与注射生理盐水的动脉粥样硬化兔相比，注射ICG的动脉粥样硬化兔的斑块靶 – 背景比高。氨基反应性ICG衍生物用于与抗体和其他生物分子制备ICG生物缀合物。所有ICG染料都需要溶解在DMSO中。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供上等的吲哚菁绿ICG Xtra-Osu。 

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产品说明书

样本标记分析

注意：该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与ICG的缀合物开发的。

1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：

将100L反应缓冲液（例如，1M碳酸钠溶液或1M磷酸盐缓冲液，pH~9.0）与900L目标蛋白质溶液（例如抗体，蛋白质浓度> 2mg / ml，）混合，得到1 mL蛋白标记储备液。

注意1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。 如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则需使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注意2：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。

注意3：牛血清白蛋白（BSA）、明胶稳定不纯的抗体等标记的效果不理想。

注意4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率明显降低。 为获得*佳标记效率，建议*终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

2.准备染料储备溶液（溶液B）：

将无水DMSO加入到ICG染料小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意：在开始缀合之前准备染料储备溶液（溶液B），现配现用，保持溶液新鲜。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可以在不受光照和潮湿的情况下储存在冰箱中两周。 避免冻融循环。

3.确定*佳染料/蛋白质比例（可选）：

注意：每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能对其结合亲和力产生不利影响，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定*佳染料/蛋白质比率。通常，对于大多数染料 – 蛋白质缀合物，推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）作为起点：将5μl染料储备溶液（溶液B，假设染料储备溶液为10 mM）加入到样品瓶中，蛋白质溶液（95μl溶液A）。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD，蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。

3.2运行结合反应（见下面的步骤4）。

3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比例（DOS）。

3.6运行上述4种缀合物的功能检测，确定*佳的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。

4.运行缀合反应：

4.1在有效摇动下，将适量的染料储备溶液（溶液B）加入到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中。

注意：溶液B /溶液的*佳摩尔比由步骤3.6确定。 如果跳过步骤3，我们建议使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物（直接来自步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时，加入PBS（pH 7.2-7.4）。

5.4将更多PBS（pH 7.2-7.4）加入所需样品中以完成柱纯化。 

注意1：对于立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。

注意2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。

ReadiLink™xtra Rapid AF750抗体标记试剂盒 货号：1988-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称：ReadiLink™xtra Rapid AF750抗体标记试剂盒
  • 产品货号：1988
  • 产品品牌：AAT Bioquest

简单介绍

AF750抗体标记试剂盒

产品描述

ReadiLink™xtra Rapid AF750抗体标记试剂盒

货号 1988 存储条件                  f/l
规格                       2 Labelings                  价格                  
Ex (nm) 752 Em (nm) 776
分子量 溶剂
产品详细介绍

ReadiLink™xtra快速抗体标记试剂是AAT 研发，由金畔代理销售的AF750标记的抗体标记试剂盒。ReadiLink™xtra快速抗体标记试剂盒基本上只需要2个简单的混合步骤，而无需纯化。ReadiLink™试剂盒中使用的预活化AF750非常稳定，对抗体表现出良好的反应性和选择性。该试剂盒具有用于标记〜2×50 ug抗体的所有基本成分。试剂盒中提供的两个预活化AF750染料小瓶中的每一个均经过优化，可标记约50 µg抗体。ReadiLink™xtra AF750快速抗体标记试剂盒提供了一种方便而强大的方法，可以使用近红外荧光的AF750荧光团标记单克隆和多克隆抗体。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供上等的抗体标记试剂盒。 

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产品说明书

实验方案

工作溶液配制

蛋白质工作溶液（A）

为了标记50 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将5 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与50 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：如果蛋白质浓度不同，请相应地调整蛋白质体积，以使〜50 µg蛋白质可用于标记反应。
注意：要标记100 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将10 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与100 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：蛋白质应溶于1X磷酸盐缓冲盐水（PBS），pH 7.2-7.4；如果蛋白质溶解在甘氨酸缓冲液中，则必须针对1X PBS（pH 7.2-7.4）进行透析，或使用10 kDa的Amicon Ultra-0.5，Ultracel-10膜去除游离的胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）被广泛用于蛋白质沉淀。
注意：为获得*佳标记效率，建议*终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL，结合效率明显降低，低于1 mg / mL。 

操作步骤

运行缀合反应

  1. 将蛋白质工作溶液（溶液A）添加到一个小瓶的标记染料（组分A）中，并通过将小瓶涡旋几秒钟将它们充分混合。
    注意：如果要标记100 µg的蛋白质，请使用两个小瓶（组分A），将100 µg的蛋白质分成2 x 50 µg的蛋白质，并使每个50 µg的蛋白质与一小瓶的标记染料反应。然后合并两个小瓶，用于下一步。

  2. 将缀合反应混合物在室温下放置30-60分钟。
    注意：如果需要，可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。 

停止缀合反应

  1. 将5 µL（对于50 µg蛋白质）或10 µL（对于100 µg蛋白质）添加到缀合反应混合物中，占TQ™染色猝灭缓冲液（组分C）总反应体积的10％；混合均匀。

  2. 在室温下孵育10分钟。标记的蛋白（抗体）可以使用了。 

蛋白质缀合物的储存

蛋白质缀合物应在载体蛋白（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5 mg / mL的浓度存储。为了更长的存储时间，可以将蛋白质缀合物冻干或分成单份使用，并存储在≤–20°C下。

ReadiLink™xtra Rapid AF647抗体标记试剂盒 货号：1985-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品名称：ReadiLink™xtra Rapid AF647抗体标记试剂盒
  • 产品货号：1985
  • 产品品牌：AAT Bioquest

简单介绍

ReadiLink™xtra Rapid AF647抗体标记试剂盒

产品描述

ReadiLink™xtra Rapid AF647抗体标记试剂盒

ReadiLink™xtra Rapid AF647抗体标记试剂盒 货号：1985

货号 1985 存储条件                 f/l
规格                         2 Labelings                     价格                 
Ex (nm) 650 Em (nm) 671
分子量 溶剂
产品详细介绍

ReadiLink™xtra快速抗体标记试剂是AAT 研发，由金畔代理销售的AF647标记的抗体标记试剂盒。ReadiLink™xtra快速抗体标记试剂盒基本上只需要2个简单的混合步骤，而无需纯化。ReadiLink™试剂盒中使用的预活化AF647非常稳定，对抗体表现出良好的反应性和选择性。该试剂盒具有用于标记〜2×50 ug抗体的所有基本成分。试剂盒中提供的两个预活化AF647染料小瓶中的每一个均经过优化，可标记约50 µg抗体。ReadiLink™xtra AF647快速抗体标记试剂盒提供了一种方便而强大的方法，可以使用红色的AF647荧光团标记单克隆和多克隆抗体。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供上等的抗体标记试剂盒。 

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产品说明书

实验方案

工作溶液配制

蛋白质工作溶液（A）

为了标记50 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将5 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与50 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：如果蛋白质浓度不同，请相应地调整蛋白质体积，以使〜50 µg蛋白质可用于标记反应。
注意：要标记100 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将10 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与100 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：蛋白质应溶于1X磷酸盐缓冲盐水（PBS），pH 7.2-7.4；如果蛋白质溶解在甘氨酸缓冲液中，则必须针对1X PBS（pH 7.2-7.4）进行透析，或使用10 kDa的Amicon Ultra-0.5，Ultracel-10膜去除游离的胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）被广泛用于蛋白质沉淀。
注意：为获得*佳标记效率，建议*终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL，结合效率明显降低，低于1 mg / mL。 

操作步骤

运行缀合反应

  1. 将蛋白质工作溶液（溶液A）添加到一个小瓶的标记染料（组分A）中，并通过将小瓶涡旋几秒钟将它们充分混合。
    注意：如果要标记100 µg的蛋白质，请使用两个小瓶（组分A），将100 µg的蛋白质分成2 x 50 µg的蛋白质，并使每个50 µg的蛋白质与一小瓶的标记染料反应。然后合并两个小瓶，用于下一步。
  2. 将缀合反应混合物在室温下放置30-60分钟。
    注意：如果需要，可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。 

停止缀合反应

  1. 将5 µL（对于50 µg蛋白质）或10 µL（对于100 µg蛋白质）添加到缀合反应混合物中，占TQ™染色猝灭缓冲液（组分C）总反应体积的10％；混合均匀。
  2. 在室温下孵育10分钟。标记的蛋白（抗体）可以使用了。 

蛋白质缀合物的储存

蛋白质缀合物应在载体蛋白（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5 mg / mL的浓度存储。为了更长的存储时间，可以将蛋白质缀合物冻干或分成单份使用，并存储在≤–20°C下。

 

图示

ReadiLink™xtra Rapid AF647抗体标记试剂盒 货号：1985

图1. HeLa细胞中微管蛋白的**荧光染色。HeLa细胞用4％PFA固定，用0.1％Triton X-100透化并封闭。然后将细胞与小鼠抗微管蛋白抗体一起孵育，并用ReadiLink™xtra Rapid AF647抗体标记试剂盒（#1985）标记的山羊抗小鼠IgG染色。