热启动plus DNA聚合酶

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快速、高特异性扩增,适合多种应用

  • 高特异性PCR,所需优化次数少
  • 快速激活热启动酶,只需5分钟
  • 即用型PCR上样缓冲液,操作更简单快速

该聚合酶具备高特异性、高灵敏度,HotStarTaq DNA Polymerase所需的优化次数少,激活时间为5分钟。可在室温下构建PCR反应体系,且反应产物可直接上样至凝胶,因为新型的CoralLoad PCR缓冲液包含两种凝胶示踪染料。同时提供标准QIAGEN PCR缓冲液,便于操作。此外,一种新型的添加剂Q-Solution可确保高效扩增难扩增的模板(如富含GC的模板)。独特的试剂盒组成和经优化的实验方案使PCR流程更加高效。
 

Performance
每一批HotStarTaq Plus DNA Polymerase都经过全方位的质量控制测试,包括:严格的PCR特异性和重复性分析,即使低拷贝的靶分子也可扩增。通过检测,HotStarTaq Plus DNA Polymerase优于其它供应者提供的试剂盒,确保高度特异性和在热启动PCR中的卓越表现(参见”Highest specificity”、”Higher specificity with different primer–template systems”和表格)。该试剂盒提供的新型PCR缓冲液使得在多种PCR条件下都维持高特异性,无需优化。Q-Solution可进一步优化PCR,且该试剂盒中提供(参见”Amplification of difficult templates”)。总之,这些组合确保了在多种应用中的特异性扩增(参见”Effect of hot start on RT-PCR performance”和”Highly sensitive single-cell PCR”)。

热启动模式比较
  HotStarTaq Plus DNA Polymerase HotStarTaq DNA Polymerase Supplier AII提供的热启动酶 供应商R 供应商I (抗体介导) 手动 石蜡屏障
特异性扩增 ++ ++ + ++ + +/– +/–
PCR优化需求 ++ ++ +/– +/– +/–
易用性 +++ ++ ++ + +
激活速度 ++ + ++ ++ ++
 
HotStarTaq Plus DNA Polymerase特性

浓度:5 units/µl 
重组酶:是 
底物类似物:dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、fluorescent-dNTP/ddNTP 
延伸速度:72°C条件下2–4 kb/min
酶半衰期:97°C条件下10 min,94°C条件下60 min 
扩增效率:≥105倍 
5’–>3’外切酶活性:是 
额外添加A:是 
3’–>5′ 外切酶活性:否 
核酸酶污染:否 
蛋白酶污染:否 
RNases污染:否 
自启活性:否  

Principle

HotStarTaq Plus DNA Polymerase具备同HotStarTaq DNA Polymerase一样的卓越表现,激活时间只需5分钟。

 HotStarTaq Plus DNA Polymerase,是一种经修饰的QIAGEN Taq DNA Polymerase,以非活性形式提供,常温下没有聚合酶活性。避免PCR构建和循环初始阶段低温条件下非特异性引物的延伸和引物二聚体的形成(参见”Highest specificity”和”Higher specificity with different primer-template systems”)。95°C条件下孵育5分钟即可激活HotStarTaq Plus DNA Polymerase,这个步骤可整合入已有的热循环程序中。

QIAGEN PCR Buffer

QIAGEN PCR Buffer通过提高每个PCR扩增退火过程特异性引物的结合比例,确保PCR每个循环特异性扩增(参见”Increased specificity of primer annealing”)。独特的KCl和(NH4)2SO4平衡组合,使得该缓冲液与传统的PCR缓冲液相比在很宽的温度和Mg2+浓度范围内都有严格的引物退火条件和高度的特异性,无需进行耗时的优化。

CoralLoad PCR Buffer

HotStarTaq Plus DNA Polymerase同时提供CoralLoad PCR Buffer,CoralLoad PCR Buffer具备QIAGEN PCR Buffer的所有优点,同时可直接将PCR产物上样到琼脂凝胶上,无需加入凝胶上样缓冲液。CoralLoad PCR Buffer具备同样高的PCR特异性,与常规的QIAGEN PCR Buffer一样可减少优化过程。此外,它包含两种指示染料,橙色染料和红色染料,可方便的判断DNA的迁移距离和优化跑胶时间(参见”CoralLoad PCR Buffer”)。该缓冲液提高移液的可见性,并可直接将PCR产物上样至凝胶,提高便利性。

Q-Solution

该产品同时提供Q-Solution,一种新型的PCR添加剂,通过修饰DNA熔解行为促进难扩增模板的扩增。这种独特的试剂可进一步优化由模板引起的表现不理想的PCR,如过多的二级结构和富含GC的模板(参见”Amplification of difficult templates”)。不同于DMSO和其他PCR添加剂,Q-Solution的浓度是确定的,没有毒性,并且保证PCR的纯度。而且PCR中加入Q-Solution不会影响PCR的准确性。

Procedure
HotStarTaq Plus DNA Polymerase提供高效、经优化的实验方案,用于快速、方便的构建PCR反应体系。95°C条件下孵育5分钟激活HotStarTaq DNA Polymerase,可以整合入已有的热循环程序。反应可在室温下建立,更加方便和易于使用(参见”HotStarTaq Plus procedure”)。该试剂盒同时提供CoralLoad PCR Buffer,提高移液的可见性,并可直接将PCR产物上样至凝胶,提高便利性。

Applications

HotStarTaq Plus DNA Polymerase适合多种应用,包括各种富有挑战性的研究,如各种扩增应用:

  • 复杂的基因模板
  • 复杂的cDNA模板(如RT-PCR)
  • 低拷贝的靶分子(如单细胞PCR)
  • 多重引物对反应
Features
Specifications
应用 PCR, RT-PCR, Complex genomic templates, very low-copy targets
酶活 5′ -> 3′ exonuclease activity
预混液 No
反应类型 PCR amplification
real-time或终点法PCR Endpoint
样本/目标类型 Genomic DNA and cDNA
单一或多重 Single
有/无热启动酶 With hotstart

相关产品      
商品编号 商品品名 规格 品牌
203605 热启动plus DNA聚合酶 1000U Qiagen
203603 热启动plus DNA聚合酶 250U Qiagen
203609 热启动plus DNA聚合酶 25000U Qiagen
203601 热启动plus DNA聚合酶 50U Qiagen
203607 热启动plus DNA聚合酶 5000U Qiagen

热启动PCR DNA聚合酶

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高特异性扩增,所需优化次数少

  • 所需优化次数少
  • PCR特异性高
  • 操作方便,可在室温下构建反应体系

不同于抗体介导的方法,HotStarTaq DNA Polymerase应用化学介导的热启动,可确保聚合酶在PCR初始加热阶段完全没有活性。HotStarTaq DNA Polymerase提供独特的QIAGEN PCR Buffer,将非特异性扩增产物、引物二聚体和其他污染降至最低。一种新型的添加剂Q-Solution,可实现难扩增的模板(如GC含量高的模板)高效扩增。
 

Performance

每一批HotStarTaq DNA Polymerase都经过全方位的质量控制测试,包括:严格的PCR特异性和具有可重复性的试剂,即使低拷贝的靶分子也可扩增。通过检测,HotStarTaq DNA Polymerase可确保高度特异性和在热启动PCR中的卓越表现(参见”Higher specificity with different primer–template systems”、”Superior performance”和表格)。该试剂盒提供的新型PCR缓冲液使得在多种PCR条件下都维持高特异性,无需优化(参见”Tolerance to variable magnesium concentration”)。试剂盒中的Q-Solution可进一步优化PCR(参见”Amplification of difficult templates”)。总之,这些组合确保了在多种应用中的特异性扩增(参见”Effect of hot start on RT-PCR performance”和”Highly sensitive single-cell PCR”)。

热启动模式比较
  HotStarTaq DNA Polymerase Supplier AII提供的热启动酶 抗体介导 手动 蜡屏障
特异性扩增 ++ + + +/– +/–
PCR优化需求 ++ +/– +/–
易用性 ++ ++ +
 
HotStarTaq DNA Polymerase特性

浓度:5 units/µl 
重组酶:是 
底物类似物:dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、fluorescent-dNTP/ddNTP 
延伸速度:72°C条件下2–4 kb/min
酶半衰期:97°C条件下10 min,94°C条件下60 min 
扩增效率:≥105倍 
5’–>3’外切酶活性:是 
额外添加A:是 
3’–>5′ 外切酶活性:否 
核酸酶污染:否 
蛋白酶污染:否 
RNases污染:否 
自启活性:否  

Principle

HotStarTaq DNA Polymerase,一种经修饰的Taq DNA Polymerase,确保热启动PCR的高度特异性。该试剂盒包括新型的双阳离子PCR缓冲液、Q-Solution和MgCl2

HotStarTaq DNA Polymerase

HotStarTaq DNA Polymerase以非活性形式提供,常温下没有聚合酶活性。避免PCR构建和循环初始阶段低温条件下非特异性引物的延伸和引物二聚体的形成(参见”Superior performance in hot-start PCR”和”Higher specificity with different primer–template systems”)。95°C条件下孵育15分钟即可激活HotStarTaq DNA Polymerase,这个步骤可整合入已有的热循环程序中。

QIAGEN PCR Buffer

QIAGEN PCR Buffer通过提高每个PCR扩增退火过程特异性引物的结合比例,确保PCR每个循环特异性扩增(参见”Increased specificity of primer annealing”)。独特的KCl和(NH4)2SO4平衡组合,使得该缓冲液与传统的PCR缓冲液相比在很宽的温度和Mg2+浓度范围内都有严格的引物退火条件和高度的特异性,无需进行耗时的优化(参见”Tolerance to variable magnesium concentration”)。

Q-Solution

该产品同时提供Q-Solution,一种新型的PCR添加剂,通过更改DNA熔解行为促进难扩增模板的扩增。这种独特的试剂可进一步优化由模板引起的表现不理想的PCR,如过多的二级结构和富含GC的模板(参见”Amplification of difficult templates”)。不同于DMSO和其他PCR添加剂,Q-Solution的浓度是确定的,没有毒性,并且保证PCR的纯度。而且PCR中加入Q-Solution不会影响PCR的准确性。

Procedure
HotStarTaq DNA Polymerase提供高效、经优化的实验方案,用于快速、方便的构建PCR反应体系。95°C条件下孵育15分钟激活HotStarTaq DNA Polymerase,可以整合入已有的热循环程序。反应可在室温下建立,更加方便和易于使用(参见”HotStarTaq procedure”)。

Applications

HotStarTaq DNA Polymerase适合多种应用,包括各种富有挑战性的研究,如各种扩增应用:

  • 复杂的基因模板
  • 复杂的cDNA模板(如RT-PCR)
  • 低拷贝的靶序列(如单细胞PCR)
  • 多重引物对反应
 

Features
Specifications
应用 PCR, RT-PCR, Complex genomic templates, very low-copy targets
酶活 5′ -> 3′ exonuclease activity
预混液 No
反应类型 PCR amplification
real-time或终点法PCR Endpoint
样本/目标类型 Genomic DNA and cDNA
单一或多重 Single
有/无热启动酶 With hotstart

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商品编号 商品品名 规格 品牌
203205 热启动PCR DNA聚合酶 1000U Qiagen
203203 热启动PCR DNA聚合酶 250U Qiagen
203209 热启动PCR DNA聚合酶 25000U Qiagen
203207 热启动PCR DNA聚合酶 5000U Qiagen

高灵敏度,高保真热启动PCR聚合酶

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用于高灵敏度,高保真热启动PCR

  • 高灵敏度、高特异性
  • 独特的UA/TA克隆
  • 保真性比Taq DNA Polymerase高10倍
  • 可在室温下构建反应体系,酶活化速度快

经优化的即用型试剂盒包括高保真PCR所需的所有试剂、酶、缓冲液和dNTPs。HotStar HiFidelity DNA Polymerase是一种经特异修饰的产生A突出末端的热启动校对酶,能够直接、高效的进行UA/TA克隆。缓冲液中包含Factor SB,可在PCR体系建立时防止引物和模板的降解,提供高特异性和高保真PCR。此外,Q-Solution能够有效扩增难扩增的模板(如富含GC的模板)。
 

Performance

HotStar HiFidelity Polymerase Kit包含一种经特异修饰的热启动校对酶,可在PCR体系建立时防止引物和模板的降解,提供高保真PCR,无需优化。通过检测,HotStar HiFidelity DNA Polymerase Kit可确保高特异性和高灵敏度扩增(参见”Highly sensitive and reliable PCR”)。HotStar HiFidelity DNA Polymerase的保真性比Taq DNA polymerase高10倍。新型的HotStar HiFidelity PCR Buffer包含专有的Factor SB,提高PCR的灵敏度和可靠性,尤其在起始模板量较少的条件下。该试剂盒同时提供Q-Solution,可进一步优化PCR(参见”Amplification of difficult templates”)。

HotStar HiFidelity DNA Polymerase特性

浓度:2.5 units/μl 
5’–>3’外切酶活性:否 
3’–>5’外切酶活性:是 
额外添加A(末端转移酶活性):
半衰期:95°C条件下>4小时 
核酸酶污染:否 
蛋白酶污染:否 
RNase污染:

Principle

通常利用高保真酶3’→5’核酸外切酶的活性去除错配的整合碱基。但是,该活性会在PCR体系建立和起始时降解引物,而导致非特异性启动、扩增,甚至扩增产物失败,尤其在模板量较少的条件下。

HotStar HiFidelity DNA Polymerase

HotStar HighFidelity DNA Polymerase是从新型Pyrococcus spp.中特异分离的,经过化学修饰使聚合酶和核酸外切酶失活。5分钟热启动激活酶组分,使PCR起始阶段就有高校对能力。独特的修饰确保体系建立过程中引物和酶的完整性,防止错误启动。HotStar HiFidelity DNA Polymerase的可靠性能确保高特异性和高灵敏度的扩增。

HotStar HiFidelity PCR Buffer

新型的HotStar HiFidelity PCR Buffer包含独特的PCR添加剂,以及浓度已经优化的dNTPs和MgSO4。Factor SB是一种特有的PCR添加剂,提高PCR的灵敏度和可靠性(参见”Highly sensitive and reliable PCR”)。新型的Factor SB可确保模板DNA的完整性,该DNA常常会被具有3’→5’核酸外切酶活性的高保真酶降解。

预优化试剂能够可靠的扩增特异性PCR产物,且出错率低。该缓冲液通过提高每个PCR扩增退火过程特异性引物的结合比例,确保PCR每个循环特异性扩增(参见”Increased specificity of primer annealing”)。独特的KCl和(NH4)2SO4平衡组合,使得HotStar HiFidelity PCR Buffer与传统的PCR缓冲液相比在很宽的温度和Mg2+浓度范围内都有严格的引物退火条件和高度的特异性,无需进行耗时的优化。

HotStar HiFidelity PCR Buffer也含有浓度经特定优化的dNTPs,用于方便的建立PCR反应体系和获得可靠的结果。该缓冲液最大程度上增加了HotStar HiFidelity DNA Polymerase的保真性,确保低出错率。HotStar HiFidelity Polymerase Kit灵敏度高、特异性强以及使用HotStar HiFidelity PCR Buffer而无需优化的特性使其适合多种高保真PCR应用。

Q-Solution

HotStar HiFidelity Polymerase Kit同时提供Q-Solution,一种新型的PCR添加剂,通过更改DNA熔解行为促进难扩增模板的扩增。这种独特的试剂可进一步优化由模板引起的表现不理想的PCR,如过多的二级结构和富含GC的模板(参见”Amplification of difficult templates”)。不同于DMSO和其他PCR添加剂,Q-Solution的浓度是确定的,没有毒性,并且保证PCR的纯度。而且PCR中加入Q-Solution不会影响PCR的准确性。

完整的试剂盒规格

HotStar HiFidelity Polymerase Kit包含PCR所需的所有组分。无需额外购买其他试剂或缓冲液。

Procedure

HotStar HiFidelity操作流程高效,只需按照试剂盒中已优化的试验方案操作即可。HotStar HiFidelity DNA Polymerase经过化学修饰,可以暂时性的使聚合酶和3’–>5’核酸外切酶失活。这种抑制作用可使引物和模板在PCR体系建立和循环起始阶段过度降解。95°C条件下孵育5分钟即可激活聚合酶和校对活性,可以整合入已有的热循环程序。这种修饰确保可在室温下方便的建立反应体系,而不会影响PCR的特异性和产量。

TA/UA克隆

与其他高保真DNA聚合酶相比,使用HotStar HiFidelity DNA Polymerase获得的PCR产物可直接用于TA-或UA-克隆(参见”Efficient TA/UA cloning”)。

产物的长度和灵敏度

鉴于HotStar HiFidelity Polymerase Kit的高灵敏度,即使使用极微量的起始原料也可扩增片段(如1 ng的人基因组DNA)。使用基因组DNA获得的产物长度可达5 kb,而λDNA获得的产物长度可达10 kb,表明HotStar HiFidelity Polymerase Kit适合多种应用,包括用于克隆的长片段DNA的扩增。

Applications

HotStar HiFidelity Polymerase Kit适合多种要求高灵敏度和低出错率的热启动PCR应用,如克隆和定点突变。

 

Features
Specifications
应用 Cloning, mutation analysis, TA- or UA-cloning procedures
酶活 3′ -> 5′ exonuclease activity, A-addition
预混液 No
反应类型 PCR amplification, proofreading
real-time或终点法PCR Endpoint
样本/目标类型 Genomic DNA and cDNA
单一或多重 Single
有/无热启动酶 With hotstart

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