日度归档：2023年10月28日

5-羟甲基尿苷 DNA 激酶–NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 其它

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5-羟甲基尿苷 DNA 激酶--NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品描述

 该酶是创新酶（Enzyme for Innovation, EFI）。创新酶工程由 NEB 发起，旨在为科研界提供独一无二的酶，从而为新的创新应用的发现创造条件。完整创新酶列表请登陆 www.neb.com/EnzymesforInnovation。

概述

 5-羟甲基尿苷 DNA 激酶（5-HMUDK）可将 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到 DNA 链上的 5-羟甲基尿苷的羟甲基上

反应条件

 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液，37℃ 温育。

热失活：80℃ 加热 10 分钟。
 

单位定义

 1 单位指在 20 μl 反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟能保护 1 μg 枯草芽孢杆菌噬菌体 SP8 基因组 DNA 不被 NcoI-HF 限制性内切酶切割所需要的酶量。

浓度

 20,000 units/ml

Competent Cell Preparation Kit酶试剂盒Takara Clontech

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Competent Cell Preparation Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9139 Competent Cell Preparation Kit 200 Rxns ￥190 Competent Cell Preparation Kit Competent Cell Preparation Kit Competent Cell Preparation Kit
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■ 制品内容 (200 次量)
Solution A 20 ml
Solution B 20 ml
 
■ 制品说明
大肠杆菌经过处理后可以摄取外源DNA (Plasmid DNA、Phage DNA等)，处于这种状态的细胞称为感受态细胞 (Competent Cell)。在基因工程实验中，经常要使用各种感受态细胞进行DNA的转化操作。
实验使用的感受态细胞的来源大体可以分为两种：一种是购买商品化的感受态细胞，但商品化感受态细胞成本高、运输及保存有一定困难 (超低温)；另一种是自己制备感受态细胞，实验人员自己制作感受态细胞时，往往受到各种试剂及实验条件等限制，制备的感受态细胞效率低，达不到实验要求。
Competent Cell Preparation Kit是一种方便、高效、快速制备感受态细胞的试剂盒。使用本试剂盒制备的感受态细胞可以满足大多数实验的需要，并且适用于大多数常用的大肠杆菌，例如：E.coli DH5α、JM109、CJ236、HB101、MV1184、BMH71–18mutS等，转化效率均可以达到1×106 cfu/μg pUC19以上 (转化效率根据大肠杆菌细胞系及转化用DNA不同稍有差异)。使用本试剂盒制备的感受态细胞可以在-80℃保存一年。
 
■ 保存
4℃。
 
■ 注意事项
1. 制作感受态细胞时应使用专用的玻璃器皿或塑料容器。洗刷这些玻璃器皿或塑料容器时应尽量洗净。由于微量的洗涤剂或污染物都可能降低感受态细胞的转化效率，因此在洗刷完用于制作感受态细胞的专用玻璃器皿或塑料容器后，建议用去离子水浸泡一晚，然后再充分洗净。
2. 制作感受态细胞时使用的菌种，不应使用4℃或常温保存的传代细菌。应使用-70℃保存的菌种，在LB/抗生素平板培养基上分级划线培养后，挑取单菌落。使用这种菌种制作的感受态细胞，能提高转化效率。
3. 培养感受态细胞制备用菌体时，OD600值的测定应随时进行，以使OD600值控制在0.35～0.5之间。如果OD600值超出此范围，可能降低感受态细胞的转化效率。
4. 用于感受态细胞制备的菌体培养停止后要立即处理，不要将培养液过长时间室温放置，在冰中放置时也不要时间过长。
5. 感受态细胞的制备操作过程中，离心后弃上清时要尽量弃尽，否则会降低感受态细胞的转化效率。
6. 使用Solution A、Solution B悬浮沉淀时要用手指轻轻弹动Microtube管壁，禁止剧烈振荡操作。
7. 为了有效确认感受态细胞的转化效率，建议制作一批高纯度的质粒DNA分装低温 (-20℃) 保存，用作阳性对照，以确认每批制作的感受态细胞的转化效率。
 
 

页面更新：2020-10-19 13:08:20

核酸酶 P1–NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

核酸酶 P1                              收藏

核酸酶 P1--NEB酶试剂 New England Biolabs 核酸酶 P1--NEB酶试剂 New England Biolabs 核酸酶 P1--NEB酶试剂 New England Biolabs

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特性

去除 DNA 分子上单链末端以形成平末端

切割发夹环
DNA 或 RNA 碱基组成分析
蛋白纯化过程中去除核酸
 

概述

 核酸酶 P1（来源自 p.citrinum）是锌依赖的单链特异性核酸酶，能无碱基特异地水解 RNA 和单链 DNA 上的 3’→5′ 磷酸二酯键。该酶也具有 3’-磷酸单酯酶活性。

 
尽管核酸酶 P1 是单链特异性核酸酶，其在核酸酶 P1 反应缓冲液中对双链 DNA （dsDNA）也具有活性。在双链 DNA 存在的情况下，如果只想消化单链核苷酸（ssDNA 或 RNA），建议核酸酶 P1 在 1X NEBuffer 1.1 反应缓冲液条件下进行反应，以使该酶发挥最大单链核酸酶活性。
 

反应条件

 1X 核酸酶 P1 反应缓冲液，37℃ 温育。

热失活：75℃ 加热 10 分钟。
 

单位定义

 1 单位指在 1X 核酸酶 P1 反应缓冲液体系中，37℃ 条件下，每分钟消化圆酵母（Torula Yeast）总 RNA 释放 1 μg 酸可溶性核苷酸所需要的酶量。

浓度

 100,000 units/ml

注意事项

核酸酶 P1 底物特异性如下：3’AMP＞RNA＞ssDNA＞＞dsDNA

2’AMP 的水解效率比 3’AMP 低 3000 倍。