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TaKaRa Competent Cells BL21酶试剂盒Takara Clontech

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TaKaRa Competent Cells BL21
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9126 TaKaRa Competent Cell BL21 100 μl x 10 ￥347 TaKaRa Competent Cells BL21 TaKaRa Competent Cells BL21 TaKaRa Competent Cells BL21
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■ 制品内容TaKaRa Competent Cells BL21
TaKaRa Competent Cells BL21 10 × 100 μl
pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 10 × 1 ml
*SOC Medium:          2%
   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
 10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
E.coli BL21来源于B株，为lon蛋白水解酶、ompT外膜蛋白水解酶缺陷型，因此表达的外源蛋白质在该体系中具有更高的稳定性。本制品有利于外源蛋白质的稳定表达。
本制品可用于pCold I-IV DNA 和pCold TF DNA的蛋白质表达，但不适合于启动子为T7的蛋白质表达体系，如pET系列，因为BL21宿主不表达T7 RNA聚合酶。另外，不建议使用此菌株构建或制备质粒，因为它不是recA基因缺失型菌株。
注意：本制品不可用于电击法转化。
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果不是-80℃保存，转化效率将会降低。可使用附带的pUC19 DNA确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量控制
转入1 ng 的pUC19 DNA，涂于含有Amp+的选择培养基进行筛选。
转化效率 : ≥1×106 colonies /μg pUC19 DNA
 
■ Genotype
E.coli BL21: F–, ompT, hsdSB (rB–mB–), gal, dcm
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10 ng的高纯度质粒DNA。否则转化效率会降低。
3. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时，适当调整反应条件。
4. 使用TE buffer溶解纯化的质粒DNA。DNA溶液如果盐浓度高，可能会降低转化效率。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。
  ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
  用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
  ·φb-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。
6. 稀释时，使用SOC培养基。
7. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新：2022-09-23 13:24:48

Chaperone Competent Cell BL21 Series酶试剂盒Takara Clontech

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Chaperone Competent Cell BL21 Series
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9120 Chaperone Competent Cells BL21 Set 1 Set ￥2,613 Chaperone Competent Cell BL21 Series Chaperone Competent Cell BL21 Series Chaperone Competent Cell BL21 Series
Takara 9121 Chaperone Competent Cell pG-KJE8/BL21 100 μl × 10 ￥764 Chaperone Competent Cell BL21 Series Chaperone Competent Cell BL21 Series Chaperone Competent Cell BL21 Series
Takara 9122 Chaperone Competent Cell pGro7/BL21 100 μl × 10 ￥535 Chaperone Competent Cell BL21 Series Chaperone Competent Cell BL21 Series Chaperone Competent Cell BL21 Series
Takara 9124 Chaperone Competent Cell pG-Tf2/BL21 100 μl × 10 ￥1,106 Chaperone Competent Cell BL21 Series Chaperone Competent Cell BL21 Series Chaperone Competent Cell BL21 Series
Takara 9125 Chaperone Competent Cell pTf16/BL21 100 μl × 10 ￥1,232 Chaperone Competent Cell BL21 Series Chaperone Competent Cell BL21 Series Chaperone Competent Cell BL21 Series
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■ 制品内容Chaperone Competent Cell BL21 Series（Code No.: 9120：100 μl × 3 × 6 种）
● Chaperone Competent Cells BL21 Set (Code No.: 9120)
1. Chaperone Competent Cells pG-KJE8/BL21 3 × 100 μl
2. Chaperone Competent Cells pGro7/BL21 3 × 100 μl
3. Chaperone Competent Cells pKJE7/BL21 3 × 100 μl
4. Chaperone Competent Cells pG-Tf2/BL21 3 × 100 μl
5. Chaperone Competent Cells pTf16/BL21 3 × 100 μl
6. TaKaRa Competent Cell BL21 3 × 100 μl
7. pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 1× 10 μl
8. SOC medium* 18 × 1 ml
   
● Chaperone Competent Cells pG-KJE8/BL21 (Code No.: 9121)
● Chaperone Competent Cells pGro7/BL21 (Code No.: 9122)
● Chaperone Competent Cells pG-Tf2/BL21 (Code No.: 9124)
● Chaperone Competent Cells pTf16/BL21 (Code No.: 9125)
1. Competent Cell 10 × 100 μl
2. pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 1× 10 μl
3. SOC medium* 10 × 1 ml
*SOC medium:       2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
 10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
     
 
■ 制品说明
Chaperone Competent Cell BL21 Series是由五种分别转化一种伴侣蛋白质粒 (Chaperone Plasmid Set (Code No.: 3340)) 的Escerichia coli BL21制成的感受态细胞。
众所周知，分子伴侣参与蛋白质折叠过程，且人们已经通过大量的实验研究来表明体内蛋白折叠机理。 本制品中含有五种类型的质粒(pG-KJE8、pGro7、pKJE7、pG-Tf2、pTf16)，每一种质粒都是能有效表达一组协同作用、共同参与蛋白折叠的被称作“Chaperone team”的分子伴侣。靶蛋白与其中一种“Chaperone team”共同表达，便可增加可溶性蛋白质的回收比率，而用通常方法，由于包涵体的形成，这些表达蛋白质常常是不可回收的。
E.coli BL21来源于B株，为Lon蛋白水解酶、ompT外膜蛋白水解酶缺陷型。因此，表达的外源蛋白质在该体系中有更高的稳定性。
当进行靶蛋白与“Chaperone team”共表达实验时，通常需要三步：
1. 用伴侣蛋白质粒转化宿主E.coli； 2. 用转化体制备感受态细胞；3. 用质粒转化感受态细胞并表达靶蛋白。如果使用本产品，只需一步转化就可构建靶蛋白与“Chaperone team”的共表达体系，因为使用的E.coli BL21感受态细胞已转化有一种伴侣蛋白质粒。另外，此感受态细胞有五种质粒，不含有伴侣蛋白质粒的TaKaRa Competent BL21也可作为对照。
每种E.coli BL21感受态细胞包括一种伴侣蛋白质粒，非常适合pCold DNA系列的表达。但该产品不适合于启动子为T7的蛋白质表达体系，如pET系列，因为，宿主E.coli BL21菌株不表达T7 RNA聚合酶。
注意：本产品不可用于电击法转化。
 
■ DNA序列
  pG-KJE8 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pGRO7 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pG-TF2 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pKJE7 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pTf16 DNA (Fasta形式的txt文件)
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果不是-80℃保存，转化效率将会降低。此时，可在使用前用附带的pUC19做转化实验，确认转化效率。不能保存在液氮中。
 
■ 转化效率
Chaperone competent cells：转化1 ng pUC19，涂于Cm+和Amp+平板上进行筛选。
TaKaRa competent cell BL21：转化1 ng pUC19，涂于Amp+平板上进行筛选。
转化效率≥1×106 cfu/μg pUC19
 
■ Genotype
E.coli BL21 : F–, ompT, hsdSB (rB–mB–), gal, dcm
 
■ 注意事项
1. 从-80℃中只取出实验所用的感受态细胞，然后立即放入干冰/EtOH bath。开始实验前不要取出。
2. 可使用1.5 ml microtube替代FALCON tube，但可能会降低效率。
3. 使用100 μl感受态细胞转化时，高纯度DNA使用量不要超过10 ng，否则转化效率会降低。
4. 转化体系改变 (如感受态细胞使用量发生改变) ,或换用了其它tube等，需研讨转化条件 (如使用一般的1.5 ml tube时，请于42℃保温60秒)。
5. 除SOC培养基外，L-broth及φb-broth也可使用，但转化效率会有所下降。
6. 稀释时，使用SOC培养基。
7. L-broth plate : 成份 per liter  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1N NaOH调整到pH7.5，添加agar到1.5%，高压灭菌。
8. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
9. 本制品中含有的伴侣蛋白质粒带有来源于pACYC的复制起点和氯霉素抗性基因 (Cmr)，E.coli表达系统中可以使用常用的ColE1型、具氨苄抗性 (Ampr)筛选标记的表达载体，但不可与含有氯霉素抗性基因的表达质粒共同使用。
 

页面更新：2022-08-23 16:20:56

Stellar化学转化感受态细胞酶试剂盒Takara Clontech

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Stellar化学转化感受态细胞
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 636763 Stellar Competent Cells 10 x 100 μl ￥2,315 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
Clontech 636766 Stellar Competent Cells 50 x 100 μl ￥8,189 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
Clontech 636767 Stellar Competent Cells (96-well plate) 96 x 20 μl ￥5,518 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
Clontech 636764 Stellar Competent Cells (dam-/dcm-) 10 transformations ￥2,532 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
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Stellar化学转化感受态细胞 → Stellar化学转化感受态细胞 → Stellar化学转化感受态细胞 → Stellar化学转化感受态细胞 → Stellar化学转化感受态细胞
 
Stellar化学转化感受态细胞
Stellar化学转化感受态细胞  
Stellar化学转化感受态细胞
 
 
Stellar Competent Cells属于E. coli HST08细胞系，具有很高的转化效率，可用于多种应用：cDNA或基因组DNA文库的制备，长片段基因组文库的构建，亚克隆，甚至甲基化DNA的克隆。Stellar Competent Cells缺失切断外源甲基化DNA的基因簇(mrr-hsdRMS-mcrBC and mcrA)，所以可用于克隆甲基化DNA。 转化包含lacZ alpha基因的载体时，也可以使用Stellar Competent Cells进行蓝白筛选，例如alpha互补。 Stellar Competent Cells是Clontech's In-Fusion Cloning Kits配套使用的理想选择。
 
Stellar Competent Cells (dam–/dcm–)
Stellar Competent Cells (dam–/dcm–)属于E. coli HST04细胞系，缺失了甲基化DNA所必须的遗传因子(dam 和 dcm)。通常被dam或dcm甲基化而抑制的限制酶可以切断由该产品制备的质粒。
 
产品详情请点击：Stellar化学转化感受态细胞
 
 

页面更新：2019-11-05 09:50:57