Qiagen 73504 RNeasy FFPE Kit

从福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片中纯化总RNA
•创新的方法用于克服福尔马林造成的交联
•有效的释放RNA而不破坏其完整性
•高效的实验方案,在85分钟内即可获得纯化的RNA

从福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片中纯化总RNA

  • 创新的方法用于克服福尔马林造成的交联
  • 有效的释放RNA而不破坏其完整性
  • 高效的实验方案,在85分钟内即可获得纯化的RNA

RNeasy FFPE Kit专为从福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片中纯化总RNA而设计。*的裂解和孵育条件逆转福尔马林对RNA的修饰。并且裂解缓冲液可将RNA从组织切片中有效释放出来,防止RNA的进一步降解。试剂盒同样使用DNase和DNase Booster Buffer优化,去除基因组DNA的污染。使用RNeasy MinElute离心柱纯化获得的总RNA,洗脱体积可小至10 μl。整个纯化流程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上全自动进行。

 

Performance

使用RNeasy FFPE Kit从固定和包埋的样本中纯化获得的RNA的产量比用其他方法更高(参见”Greater yields of RNA”)。回收得到的完整RNA小可达70 nt,并且几乎没有基因组DNA的污染(参见”Recovery of all usable RNA”)。用该试剂盒从FFPE样本中纯化得到的RNA片段非常适用于real-time RT-PCR等敏感的下游应用(参见”Reliable results in real-time RT-PCR analysis”和”Successful real-time RT-PCR analysis”)。

Principle

用福尔马林固定组织会导致RNA-RNA和RNA-蛋白质的交联,这会影响RNA在酶学分析中的性能。FFPE样本固定和包埋同样会导致核酸的严重片段化。RNeasy FFPE Kit提供了*的裂解和孵育条件来逆转福尔马林对RNA的修饰。裂解缓冲液能使RNA从FFPE组织样本中有效释放,并防止进一步的RNA降解。经优化的条件能纯化得到所有可用的RNA,使用RNeasy FFPE Kit从FFPE样本中得到的RNA的产量比其他方法更高。

Procedure

整个RNeasy FFPE操作流程可在85分钟内完成(参见”RNeasy FFPE procedure”)。使用蛋白酶K裂解样本仅需15分钟。裂解后,样本在80ºC下孵育15分钟。之后,用DNase处理能有效去除样本中的基因组DNA,包括小的DNA片段。后,使用RNeasy MinElute离心柱即可收集纯化的RNA,洗脱体积14–30 µl。纯化过程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上全自动进行。

Applications

RNeasy FFPE Kit可纯化FFPE 样本中所有大于70 nt RNA,得到适用于RT-PCR等众多下游应用的RNA片段。但是,从FFPE样本中纯化得到的RNA会严重片段化,不能用于需要完整RNA的下游应用。如果使用片段化RNA可能需要做些修饰(例如在RT-PCR时设计小的扩增子)。进行cDNA合成时,不能使用oligo-dT引物,而要使用随机或基因特异性引物。
 

Features

Specifications

应用 PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
洗脱体积 14–30 µl
规格 Spin column
主要样本类型 FFPE tissue samples
处理 Manual (centrifugation), automated (QIAcube)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 RNA
样本量 1*5 µm to 4*10µm sections
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 70 minutes
产量 Varies
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产品编号 产品名称 品牌 包装
74903 植物真菌总量RNA小提试剂盒 Qiagen 20T
74904 植物真菌总量RNA小提试剂盒 Qiagen 50T
74136 组织细胞总RNA提取试剂盒 Qiagen 250T
74134 组织细胞总RNA提取试剂盒 Qiagen 50T
74524 细菌总RNA稳定提取试剂盒 Qiagen 50T

Qiagen 74004 RNeasy Micro Kit

从细胞或组织样本中纯化至多45 μg的总RNA
•数分钟内快速纯化得到高品质总RNA
•即用型RNA在各种下游应用中表现良好
•微量起始样本, RNA产量稳定
•无需酚/CHCl3抽提
•无需CsCl梯度离心,无需LiCl或乙醇沉淀

从细胞或组织样本中纯化至多45 μg的总RNA

  • 数分钟内快速纯化得到高品质总RNA
  • 即用型RNA在各种下游应用中表现良好
  • 微量起始样本, RNA产量稳定
  • 无需酚/CHCl3抽提
  • 无需CsCl梯度离心,无需LiCl或乙醇沉淀

RNeasy Micro Kit于从微量细胞和组织样本中纯化至多45 μg RNA。使用RNAlaterRNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的稳定组织样本,使用TissueRuptor或TissueLyser体系高效破碎样本。可在QIAcube全自动核酸分析仪上应用RNeasy Micro Kit实现RNA纯化全自动化。处理更大的样本,可使用RNeasy Mini Kit(离心柱结合能力为100 µg RNA)、RNeasy Midi Kit(离心柱结合能力为1 mg RNA)或RNeasy Maxi Kit(离心柱结合能力为6 mg)。

Performance

RNeasy Micro Kit可从微量样本中得到高产量总RNA,且重复性好。从少量细胞,包括单细胞以及微量标准组织样本中都能纯化得到总RNA(参见”Reliable RNA isolation from a single cell”、”Highly reproducible yields for sensitive applications”和”High-quality total RNA from fine needle aspirates”)。RNeasy Micro Kit通过高效的柱上基因组DNA消化可使珍贵的样本在定量基因表达分析中得到大的敏感度,如real-time RT-PCR(参见”Efficient on-column removal of genomic DNA”)。

Principle

RNeasy Micro Kit于从微量样本中纯化总RNA,如显微切割组织、细针穿刺样本、微量纤维组织包括心脏和肌肉组织、微量细胞、甚至是单细胞(如FACS筛选细胞)。处理显微切割FFPE组织,我们推荐使用RNeasy FFPE Kit。RNeasy技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA的纯化技术。RNeasy MinElute离心柱*的设计可确保小的洗脱体积,小至10 µl,实现RNA的高度浓缩。小洗脱体积意味着下游的反应可控制在小体积范围内,提高反应效率。高纯度确保全部样本可用于反转录等下游应用,无酶抑制。

Procedure

RNeasy Micro Kit于从微量样本中纯化总RNA。先对样本(<5 mg组织或<5 x 105个细胞)进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy MinElute离心柱,RNA(至多45 µg)结合到硅胶膜上。RNeasy Micro Kit包含RNase-free DNase,确保简单、高效的柱上基因组DNA消化,适用于敏感的应用。DNase和其他污染物被高效洗去后,10–14 µl水洗脱得到高浓度的纯化RNA。

Applications

RNeasy Micro Kit纯化得到小洗脱体积(10 µl)RNA,重复性好,适用于敏感的定量基因表达分析,包括以单细胞为起始样本的real-time RT-PCR。

 

Features

Specifications

应用 PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
洗脱体积 10–14 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Tissue, cells
处理 Manual
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 RNA
样本量 <5 mg
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 30–40 minutes
产量 Varies

 

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产品编号 产品名称 品牌 包装
74903 植物真菌总量RNA小提试剂盒 Qiagen 20T
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Qiagen 74903/74904 RNeasy Plant Mini Kit

从植物和真菌中纯化总RNA
•30分钟即可获得高品质的总RNA
•无需酚/CHCl3抽提
•无需CsCl梯度离心,无需LiCl或乙醇沉淀
•出色的RNA回收率
•即用型RNA适合多种下游应用

从植物和真菌中纯化总RNA

  • 30分钟即可获得高品质的总RNA
  • 无需酚/CHCl3抽提
  • 无需CsCl梯度离心,无需LiCl或乙醇沉淀
  • 出色的RNA回收率
  • 即用型RNA适合多种下游应用

RNeasy Plant Mini Kit含QIAshredder离心柱和RNeasy离心柱,前者用于匀质化和过滤高粘度的植物或真菌的裂解物,后者使用硅胶膜技术纯化至多100 μg高品质RNA。纯化过程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化进行。该试剂盒也可配合TissueRuptor或TissueLyser体系使用,高效破碎并匀质化植物样本。

 

Performance

RNeasy Plant Mini Kit适用于从各种植物和真菌样本中纯化总RNA,样本为10–100 mg的组织或100–1 x 107个细胞(参见”RNeasy Plant Mini Kit处理的样本”)。离心柱的结合能力达100 µg RNA。100 mg植物组织的常规产量是25–65 µg RNA,但样本不同的发育阶段和生长条件可能导致不同的RNA产量(参见”100 mg组织的产量”)。

RNeasy Plant Mini Kit 处理的样本
植物 丝状真菌
Anemone sp.
Arabidopsis thaliana1
Begonia sp.
Beta vulgaris (甜菜)2
Chlamydomonas reinhardii (单细胞藻类)
Chrysanthemum
Clarkia spp.3
Daucus carota (胡萝卜t)4
Diascia sp.
Dendranthema sp.
Euglena gracilis (单细胞藻类)
Funaria hygrometrica (苔)
Hordeum vulgare (大麦)
Lycopersicon esculentum (西红柿)5
Malus sp. (苹果)6
Nicotiana tabacum (烟草)
Oryza sativa (米)
Pelargonium sp. (天竺葵)
Petroselinum crispum (香菜)7
Pisum sativum (豌豆)
Prunus sp. (樱桃)6
Ranunculus sp.
Ribes nigrum (红醋栗)
Riccia fluitans (苔)
Sinapis arvensis (芥末)
Solanum tuberosum (土豆)8
Spinacia oleracea (菠菜)
Surfinia sp.
Triticum aestivum (小麦)
Vitis sp. (葡萄藤)6
Zea mays (玉米)
Acremonium crysogenum9
Fusarium avenaceum9
Young leaves or needles, except as indicated: 1 Flowers, buds, siliques, roots; 2 roots; 3 petals, stamen, stigma, sepals, style; 4 cultured cells; 5 mature flower, expanded leaves, shoot tip, stem, green fruit; 6 budwood; 7 seedlings; 8 dormant tuber; 9 mycelium
100 mg组织的产量
样本类型 产量
拟南芥叶 35 µg
玉米叶 25 µg
番茄叶 65 µg
烟草叶 60 µg
 

纯化的植物RNA,包含病毒RNA,洗脱体积30–100 µl(参见”Detection of viruses”)。多聚糖等污染物被除去,洗脱得到的RNA适用于多种下游应用(参见”Tissue specificity of histone H4 expression”)。

Principle

RNeasy Plant Mini Kit提供QIAshredder离心柱用于匀质化和通过离心法过滤高粘度的植物或真菌裂解物,同时采用 RNeasy Mini离心柱对RNA进行纯化。RNeasy纯化技术整合了异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA纯化技术。RNeasy试剂盒提供高品质的RNA,DNA污染达到低水平。对微量DNA非常敏感的RNA应用,可在RNeasy操作流程中进行方便的柱上DNase处理,去除残留的DNA。

Procedure

样本首先被裂解,并在QIAshredder离心柱中匀质化。在裂解液中加入乙醇以提供合适的结合条件。将裂解液上样到RNeasy硅胶膜上,RNA与硅胶膜结合,各种污染物被高效洗去。浓缩的纯RNA被水洗脱(参见”RNeasy Plant Mini procedure”)。

Applications

RNeasy技术纯化得到的高品质RNA适合各种下游应用,包括:

Northern印迹、点印迹和狭缝印迹

终点式RT-PCR

定量real-time RT-PCR

芯片分析

Poly A+ RNA筛选

Features

Specifications

应用 PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
洗脱体积 30–100 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Plant samples
处理 Manual
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 RNA
样本量 10–100 mg
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 30 minutes
产量 25–60 µg
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产品编号 产品名称 品牌 包装
74903 植物真菌总量RNA小提试剂盒 Qiagen 20T
74904 植物真菌总量RNA小提试剂盒 Qiagen 50T
74136 组织细胞总RNA提取试剂盒 Qiagen 250T
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74524 细菌总RNA稳定提取试剂盒 Qiagen 50T