血液DNA中提试剂盒

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从血液和相关体液中纯化基因组DNA、线粒体DNA或病毒DNA,最高可达60 μg

  • 快速纯化高品质、即用型DNA
  • 无需有机提取或乙醇沉淀
  • 重复性好,产量高
  • 完全去除污染物和抑制剂

QIAamp DNA Blood Midi Kits应用硅胶模技术,用于实验室从全血、血浆、血清和其它体液中纯化DNA。QIAamp DNA Blood Midi Kit可处理0.3–2 ml新鲜或冷冻的人类全血。QIAamp Midi离心柱可在离心机或真空装置上处理(使用真空管需要额外的缓冲液AW1 [货号:19081]和AW2 [货号:19072] )。

 

Performance

QIAamp DNA Blood Kits根据样本存储条件和新鲜程度不同,可纯化获得200 bp–50 kb的DNA(参见”Apoptotic banding in stored blood”)。纯化的DNA适用于长片段PCR扩增(参见”Long-range PCR”)和RFLP分析等等,如亲子鉴定(参见”Paternity testing by RFLP analysis”)。

使用QIAamp DNA Blood Midi Kit获得DNA的回收率可高达94.5%,依初始细胞密度而定(见表)。

从不同细胞密度的人类全血中纯化的DNA产量
白细胞/ ml DNA产量(µg) DNA回收率(%)
2.5 x 105 3.0 92.3
1.0 x 106 11.0 91.7
5.0 x 106 62.4 94.5
1.0 x 107 116.3 88.1
从2 ml人类全血中纯化得到基因组DNA,并用300 µl洗脱液洗脱。第一次的洗出液再次上样到离心柱并离心(即:再洗脱)。假设一个白细胞包含6.6 pgDNA,计算DNA回收率。 

Principle

无需苯酚-氯仿抽提。核酸特异性结合到QIAamp硅胶膜上,污染物流走。PCR抑制剂,如:二价阳离子和蛋白,可通过两步有效的洗涤被完全去除,结合在离心柱上的纯核酸可用水或试剂盒中的缓冲液洗脱。QIAamp DNA Blood技术从全血或相关体液纯化得到的基因组、线粒体或病毒DNA,可即用于PCR和印迹实验中。

Procedure

QIAamp DNA Blood Midi Kit采用快速离心柱操作简化了从全血或相关体液中分离DNA的流程(参见”procedure”)。该试剂盒可处理带有EDTA、柠檬酸盐和肝素等常规抗凝剂的新鲜或冷冻的全血样本。QIAamp DNA Blood Midi Kit可处理0.3–2 ml的样本,制备时间55分钟。可从1 ml健康全血中获得20–60 µg DNA,洗脱体积100–400 µl。

QIAamp DNA Blood Kits提供全面的操作手册,包括从不同来源的样本中纯化DNA的操作流程。QIAamp样本制备技术已完全经过验证。

Applications

QIAamp DNA Blood Midi Kit使用经验证的QIAamp技术,采用带有15 ml收集管的Midi离心柱从不同来源的样本中纯化DNA。样本来源包括:

新鲜和冷冻的全血或白膜层
血浆或血清
骨髓
淋巴细胞
体液
 

Features
Specifications
应用 PCR, southern blotting
洗脱体积 100–400 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Whole blood, body fluids
处理 Manual (centrifugation or vacuum)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 Genomic DNA, mitochondrial DNA, viral DNA
样本量 0.3–2 ml
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 55 minutes
产量 20–60 µg

 

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商品编号 商品品名 规格 品牌
51192 血液DNA大提试剂盒 10T Qiagen
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超快速质粒中提试剂盒

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超快速纯化至多750 µg转染级纯质粒或柯斯质粒DNA

  • 少于60分钟制备时间
  • 无需离心即可澄清裂解液并进行异丙醇沉淀
  • 在沉淀过程中不会损失DNA
  • 可纯化至多750 µg高拷贝质粒DNA
  • 使用LyseBlue,获得最佳的裂解效果和最大的DNA产量

HiSpeed Plasmid Kits使用阴离子交换技术,超快速、大规模纯化得到质粒DNA,无需离心。得到的DNA相当于两次CsCl梯度离心处理得到的纯度,适合转染级纯度的应用。

 

Performance

HiSpeed Plasmid Kits提供QIAfilter Cartridges、HiSpeed Tips和QIAprecipitator模块,用于快速、大规模的制备质粒,无需真空底座。针筒规格的QIAfilter和QIAprecipitator模块取代了传统阴离子交换过程中的离心操作,质粒纯化更加方便、快捷。可从150–250 ml或50 µl – 150 ml的培养体积中纯化多至750 µg(Maxi)、或200 µg(Midi)的高拷贝质粒DNA(培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌和培养基)。HiSpeed Tip支持高流速,确保更快地完成DNA结合、洗涤和洗脱。

此外,HiSpeed tips中新型的阴离子交换树脂广泛用于核酸的纯化。其独特的分离特性使得到的DNA的纯度相当于两次氯化铯梯度离心处理得到的纯度。

Principle

QIAfilter Cartridges(参见”QIAfilter Cartridge”)是一种特制的过滤器,专用于取代细菌细胞碱裂解之后的离心步骤。QIAfilter Cartridges可去除SDS沉淀,只需很短的离心时间即可澄清细菌裂解液。预装的HiSpeed tips依靠重力流运行,确保不会流干,减少了质粒制备的手工操作时间。

独特的QIAprecipitator模块(参见”QIAprecipitator module”)取代了异丙醇沉淀后传统的离心法纯化DNA。异丙醇混合液流过QIAprecipitator的时候DNA会结合上去,然后用TE缓冲液或水将DNA从QIAprecipitator洗脱下来。这一独特的模块降低了离心后转移上清液过程丢失DNA的风险。

Procedure

经中和的细菌裂解液放入QIAfilter Cartridge中,几秒内过滤澄清。滤出液放至HiSpeed tip进行质粒DNA 纯化(参见”QIAGEN Plasmid Kit procedures”)。 洗脱所得DNA与异丙醇混合并用注射器装入QIAprecipitator中。经浓缩和脱盐后,直接从QIAprecipitator上用TE缓冲液或水洗脱DNA。

Applications
HiSpeed Plasmid Kits纯化得到超纯转染级纯DNA,适合于多种应用,包括:克隆、测序、转染和质粒介导的基因沉默等。
 

Features
Specifications
应用 Transfection, cloning, sequencing, gene silencing
起始样本体积 150 µl – 250 ml culture volume
质粒类型 High-copy, cosmid DNA
处理 Manual (filtration)
每次处理样本量;通量 1 sample per run
技术 Anion-exchange technology
每次运行时间或处理样本数 <60 min
产量 <750 µg