T4DNA连接酶 NEB M0202V

T4DNA连接酶 NEB M0202V
1.特性
■ 高效连接粘性末端和平末端
■ T/A 克隆
■ dsDNA 切刻修复
■ 构建高丰度克隆文库
■ RNA 和 DNA 的连接
2.概述
该酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平齐末端或粘性末端之间的连接,还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中

上海金畔生物科技有限公司供应T4DNA连接酶 NEB M0202V;现货供应T4DNA连接酶 NEB M0202V量大优惠,咨询

 

T4DNA连接酶 NEB M0202V

1.特性

  高效连接粘性末端和平末端
  T/A 克隆
  dsDNA 切刻修复
  构建高丰度克隆文库
  RNA DNA 的连接

2.概述

该酶催化双链 DNA RNA 上相邻的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平齐末端或粘性末端之间的连接,还可以修复双链 DNARNA DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻。

3.来源

纯化自 E. coli C600 pcl857 pPLc28 lig8

4.反应条件

1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl
pH 7.5 @ 25),10 mM MgCl210 mM DTT1 mM ATP]。推荐 DNA 5´ 末端浓度为 0.1-1.0 μM16 温育。
热失活:65 10 分钟。

5.质保声明

T4 DNA 连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有zui高的活性和纯度。

6.单位定义(粘性末端活性单位)

1 单位指在 20 μl 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液中,16 反应条件下,30 分钟能使 50% 的经 Hind 消化的λDNA [ 5´ 端浓度为 0.12 μM300 μg/ml] 连接所需的酶量。

浓度

400,000 units/ml 2,000,000 units/ml

7.注意事项

 E. coli DNA 连接酶需要 NAD+ 作辅因子不同,T4 DNA 连接酶的辅因子是 ATP
稀释后的 T4 DNA 连接酶应于 -2050% 甘油贮存缓冲液(稀释缓冲液 ANEB #B8001)中保存。如稀释后马上使用,也可用 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液稀释。
只要在反应体系中补加 1 mM ATP,连接反应就可以在 NEB 提供的四种限制性内切酶缓冲液或在T4 DNA 多聚核苷酸激酶反应缓冲液中进行。

E. coli MV1184 Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

E. coli MV1184 Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9055 E. coli MV1184 Competent Cells 100 μl × 10 ¥530 E. coli MV1184 Competent Cells E. coli MV1184 Competent Cells E. coli MV1184 Competent Cells
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■ 制品内容E. coli MV1184 Competent Cells
E. coli MV1184 Competent Cells 100 μl × 10
pUC119 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium      2%   tryptone
 0.5%   yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良,制备出E.coli MV1184 Competent Cells,当1 ng pUC119转化100 μl 细胞时,转化效率可达1×107 cfu/μg。
E.coli MV1184宿主具有琥珀突变抑制因子,只允许没有发生琥珀突变的载体进行复制,可以用作琥珀突变DNA的选择宿主。同时本宿主含有F’质粒,也可作为M13 phage载体DNA的宿主菌,制备单链DNA。此外,本宿主在使用pUC系列质粒载体或M13 phage载体进行转化或转染时,具有α-互补性,可以通过在培养基中加入X-Gal 和 IPTG进行蓝白筛选。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
IPTG : Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside
 
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli MV1184:ara,△(lac-proAB),rpsL, thi (Φ80lacZ△M15), △(srl-recA) 306::Tn10 (tet r) / F’ [traD36, proAB+, lac Iq, lacZ△M15]
 
■ 保存
-80℃。
注意: 如果不在-80℃下保存,转化效率将会降低。此时,在使用前,请使用附带的pUC119 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 转化效率
按照“质粒载体转化”的使用方法,使用1 ng 的pUC119转化到100 μl E. coli MV1184 Competent Cells中,在含有氨苄青霉素的LB平板上筛选,转化效率 : >1 x 107 cfu/μg pUC119
 
 

页面更新:2021-02-09 08:46:32